У родильниц. Белорусская медицинская академия после




Скачать 88.08 Kb.
НазваниеУ родильниц. Белорусская медицинская академия после
Дата15.02.2013
Размер88.08 Kb.
ТипИсследование
Кириленко В.П.


БИОХИМИЧЕСКИЕ ПРЕОБРАЗОВАНИЯ В ШЕЙКЕ МАТКИ

У РОДИЛЬНИЦ.


Белорусская медицинская академия последипломного образования, кафедра акушерства и гинекологии, Минск, РБ


Резюме. Проведено исследование по содержание общих гликозаминогликанов (ГАГ) и их фракций: хондроитинсульфата C (І – фракция); хондроитинсульфатов A+B (ІІ – фракция); кератансульфата, гепарансульфата, гепарина (ІІІ – фракция), белково-углеводных комплексов

(общих гексоз, гексоз гликозаминогликанов и гликопротеинов), активность кислых катепсинов, β-D- гликозидазы, гиалуронидазы в сыворотке крови у родильниц на первые и третьи сутки. Установлено, что в первые сутки у родильниц наблюдается высокая активность лизосомальных ферментов, которые участвуют в лизисе коллагена, его дезорганизации и последующей перестройки. Также выявлено, что на этом фоне происходит увеличение концентрации гликозаминогликанов и их фракций к третьим суткам. Полученные данные свиедетельствуют об активных биохимических преобразованиях в формировании шейки матки и ее качественно новых структур.


Ключевые слова: гликозаминогликаны, родильницы, сыворотка крови, лизосомальные ферменты, шейка матки.


Введение

Послеродовый период начинается с момента изгнания плода и продолжается 6 – 8 недель. В течение этого времени в организме женщины проходят почти все изменения, возникшие в связи с беременностью и родами. Половые органы женщины претерпевает бурную инволюцию в котором активно участвует шейка матка, остов которой составляет соединительная ткань, а сам каркас состоит из коллагена, промежутки которого заполнены различными фракциями гликозаминогликанов. Об обратном развитии можно судить на основании данных, получаемых при измерении высоты стояния ее дна, формированию шейки матки и внутреннего зева. Так внутренний зев на 3-й день еще проходим для пальца, к 7 – 10 дню он закрывается, а наружный зев закрывается на третьей неделе после родов [1, 7].

Отмеченные изменения на протяжении послеродового периода носят субъективный характер. А на самом деле с позиции биохимических преобразований происходит активный метаболический процесс по изменению биофизических свойств шейки. Следовательно, увеличение концентрации компонентов основного вещества или повышение активности ферментов, участвующих в их метаболизме, будут свидетельствовать об интенсификации обмена исследуемого полового аппарата.


Цель: Установить наиболее значимые биохимические изменения, происходящие у родильниц на первые и третьи сутки по содержанию гликозаминогликанов и их фракций, общих гексоз, гексоз гликозаминогликанов и гликопротеинов, активности лизосомальных ферментов.


Материалы и методы

Исследование выполнено у 32 родильниц на первые и третьи сутки.

Исследовали содержание общих гликозаминогликанов (ГАГ), их фракций: хондроитинсульфата C (І – фракция); хондроитинсульфатов A+B (ІІ – фракция); кератансульфата, гепарансульфата, гепарина (ІІІ – фракция), общих гексоз, гексоз гликозаминогликанов и гликопротеинов, активность кислых катепсинов, β-D- гликозидазы, гиалуронидазы в сыворотке крови, которую брали утром натощак. Все эти соединения в определенной последовательной цепи отражают интенсивность метаболизма соединительной ткани.

Содержание гликозаминогликанов в сыворотке крови определяли методом Greiling H [8], основанном на взаимодействии ГАГ с резохином, при котором образуются преципитаты, вызывающие потерю прозрачности раствора. Степень помутнения пробы оценивали нефелометрически. Оптическую плотность измеряли на спектрофотометре «Солар» PV -2151 CC при длине волны 400 нм, синий светофильтр, в кювете с длиной оптического слоя 1 см. Общие гликозаминогликаны разделяли на фракции с помощью 1 М раствора NaCl, используя их свойство к диссоциации в солевом растворе. Первой фракцией при этом был - хондроитинсульфат C, второй - хондроитинсульфаты A+B, третьей - кератансульфат, гепарансульфат, гепарин.

Гиалуронидазную активность исследовали с помощью метода П.Н. Шараева [4]. Определение продуктов взаимодействия субстрата с карбазольным реактивом, проявляется фиолетово-розовым окрашиванием, которое оценивали с помощью спектрофотометра «Солар» PV -2151 CC при длине волны 530 нм и зеленом светофильтре. По разности оптических плотностей опытной и контрольной проб, с использованием калибровочной кривой, находили количество продуктов гидролиза гиалуроновой кислоты. Гиалуронидазную активность выражали в микромолях глюкуроновой кислоты на 1 литр сыворотки крови за 1 час инкубации (мкмоль/л•ч).

Активность кислых катепсинов - методом Anson в модификации Покровского А.А. и Арчакова А.И. [5]. Методика основана на особенностях взаимодействия этих ферментов с гемоглобином крупного рогатого скота, выделенного из крови с использованием специальных технологий. Кислые катепсины расщепляют гемоглобин до кислоторастворимых пептидных фрагментов, количество которых определяют с помощью спектрофотометра СС – 46 при длине волны 280 нм.

Определение активности β-d-глюкозидазы определяли методом Юсиповой Н.А. [6]. Метод основан на определении количества O – или n – нитрофенола, ферментативно освобожденного из субстратов β-d-гликозидазой при определенных условиях. За единицу активности фермента принимали такую, которая в стандартных условиях опыта в течение часа приводила к появлению 1 мкг n-или о-нитрофенола. Результат оценивали на спектрофотометре СС – 46 при длине волны 400 нм.

Гексозы в сыворотке крови исследовали орциновым методом после гидролиза серной кислотой. Метод определения гексоз, входящих в состав гликозаминогликанов (Г-ГАГ) и гликопротеинов (Г-ГП), разработан И.В. Неверовым и Н.И. Титоренко. Он основан на взаимодействии Г-ГАГ с цетилперидинийхлоридом, а Г-ГП - с орциновым реактивом. Количественная оценка производилась с помощью колориметрии на спектрофотометре «Солар» PV -2151 CC с зеленым светофильтром при длине 540 нм, в кювете с длиной оптического слоя 1 см. В качестве контроля использовали пробы, содержавшие 1 мл раствора едкого натра и 8,5 мл орцинового реактива [3].

Статистическая обработка полученных данных проведена с использованием непараметрических методов [2].


Результаты и обсуждение


Содержание общих гликозаминогликанов у родильниц на первые сутки составило 944±49,7 мг/л, к третьим суткам они увеличились до 1305±63,0 мг/л. Хондроитинсульфат C (І – фракция), а также кератансульфат, гепарансульфат и гепарин (ІІІ – фракция) имела тенденцию к достоверному увеличению к третьим суткам 313±30,2 и 374±40,9 мг/л; 498±18,7 и 768±42,3 мг/л соответственно (р>0,05). Содержание хондроитинсульфатов A+B (ІІ – фракция) также увеличивалось в количественном отношении и в первые сутки их концентрация составила 133±16,3, а к третьим суткам 163±17,9 мг/л, но достоверных различий не было (таблица 1).


Таблица 1 — Содержание общих гликозаминогликанов и их фракций в сыворотке крови у родильниц, мг/л, (М±m)

Категории

обследованных

n

Общие ГАГ

І- фракция

ІІ- фракция

ІІІ- фракция

Родильницы 1 сутки

16

944±49,7#

313±30,2#

133±16,3

498±18,7#

3 сутки

16

1305±63,0##

374±40,9##

163±17,9

768±42,3##

Примечание — различия между # и ## достоверны, р<0,05.


Содержание уровня общих гексоз, гексоз гликозаминогликанов и гликопротеинов имело количественное увеличение к третьим суткам по общим гексозам и гексозам гликозаминогликанов, но достоверных различий в динамике исследованных параметров не было (р>0,05) (таблица 2).


Таблица 2 — Содержание гексоз в сыворотке крови у родильниц, г/л, (М±m)

Категории

обследованных

n

Общие гексозы

Гексозы ГАГ

Гексозы ПГ

Родильницы 1 сутки

16

1,0±0,04

0,4±0,04

0,6±0,06

3 сутки

16

1,1±0,03

0,5±0,03

0,6±0,04

Примечание - достоверных различий в динамике исследованных параметров нет р>0,05.


У родильниц в первые сутки активность кислых катепсинов была 3,8±0,61 мкмоль/л•ч. На третьи сутки она снизилась почти в 2 раза и составила 2,0±0,42 мкмоль/л•ч. Гиалуронидазная активность у родильниц в первые сутки была 94±13,4 мкмоль/л•ч, но к третьим суткам ее активность снизилась в 2,5 раза и составила 36±5,4 мкмоль/л•ч (р<0,05). β-D-гликозидаза также имела тенденцию к снижению 7,2±1,81 мкмоль/л•ч в первые сутки и 6,9±0,77 мкмоль/л•ч к третьим суткам, но достоверного изменения активности не было выявлено (таблица 3).


Таблица 3 — Активность лизосомальных ферментов в сыворотке крови у родильниц, мкмоль/л•ч, (М±m)

Категории

обследованных

n

Кислые

катепсины

β-D-гликозидаза

Гиалуронидаза

Родильницы 1 сутки

16

3,8±0,61##

7,2±1,81*

94±13,4##

3 сутки

16

2,0±0,42#

6,9±0,77*

36±5,4#

Примечание — различия между # и ## достоверны, р<0,05.


После родов организм женщины вступает в новую фазу своего функционирования в биохимическом плане, принципиально отличную от периода беременности, подготовки и самим родам. После родов, за короткое время репродуктивный аппарат должен восстановить свою прежнюю анатомию и функцию. В частности, матка должна потерять около 1 кг массы, а шейка восстановить свои прежние размеры. Это проявляется мощным выбросом в кровь гликозаминогликанов, особенно к третьим суткам после родов, и наоборот в первые сутки у родильниц высокой сохранялась активность лизосомальных ферментов.


Выводы:


  1. Содержание исследованных показателей метаболизма соединительной ткани в сыворотке крови, в целом, выявило тенденции, присущие их изменению в первые и третьи сутки послеродового периода, и тесную взаимосвязь – повышение активности лизосомальных ферментов в первые сутки и увеличение концентрации гликозаминогликанов на третьи сутки

  2. Выраженность исследуемых компонентов была статистически значимой по содержанию гликозаминогликанов и их фракций и активности лизосомальных ферментов.

  3. Завершение беременности и начало послеродового периода сопровождается изменением биофизических свойств, в первую очередь шейки матки, отражают рост и активный оборот в формировании новых структур соединительной ткани – коллагена, эластина и гликозаминогликанов.



V.P.Kirilenko


Biochemical transformations in uterus cervix of puerperants


The Belarusian Medical Academy of Post-Graduate Education

Department of Obstetrics and Gynecology

Minsk, Republic of Belarus


Summary: The content of total glycosaminoglycans and their fractions, such as chondroitin sulfate C (I-fraction), chondroitin sulfate A+B (II-fraction), keratan sulfate, heparin sulfate, heparin (III-fraction), total hexose, glycosaminoglycan and glycoprotein hexoses, activity of sour cathepsins, β-D-glycosidase, hyaluronidase in blood serum of puerperants on the 1st and 3d day was studied. It has been established that during the 1st day, high activity of lysosomal enzymes participating in collagen lyses, its disorganization and further changes is observed in puerperants. An increase in glycosaminoglycans concentration and their fraction by the 3d day has been also revealed to occur on this background. The data obtained suggest active biochemical transformation in the uterus cervix and new structures formation.


Список литературы


1.

Бодяжина, В.И. Акушерство / В.И. Бодяжина. – М., «Медицина», 1980. – 432 с.

2.

Гланц, С. Медико-биологическая статистика: пер. с англ. / С. Гланц. – М.: Практика, 1998. – 459 с.

3.

Колб, В.Г. Справочник по клинической химии / В.Г. Колб, В.С. Камышников.– Минск, 1982. – 366 с.

4.

Определение гиалуронидазной активности / П.Н. Шараев [и др.] // Клин. лаб. диагностика. – 1996. - № 3. – С. 21-22.

5.

Покровский, А.А. Определение активности кислых катепсинов – модифицированный метод Anson / А.А. Покровский, А.И. Арчаков // Современные методы в биохимии: в 2 т. / Под ред. В.Н. Ореховича. – М., 1968. – Т. 2. – С. 48.

6.

Юсипова, Н.А. Активность β-d-глюкозидазы / Н.А. Юсипова // Рационализаторская работа в учреждениях здравоохранения БССР. – 1977. - № 3. – С. 21.

7.

Danfort D.N. The morphology of human cervix / D.N. Danfort // Clin. Obstet. Gynec. – 1983. – Vol. 26, № 1. – P. 7-13.

8.

Greiling, H. Die turbdimetrische Bestimmung von Sulfomucopolysacchariden mit Resochin / H. Greiling // Rheumaforsch Z. – 1961. – Bd. 20. – S. 17



Кириленко Виктор Петрович моб: 7577681, служ: 2673544




Похожие:

У родильниц. Белорусская медицинская академия после iconГосударственное учреждение образования «белорусская медицинская академия последипломного образования» утверждаю ректор Белмапо
Шмелева Н. Д., старший преподаватель, кафедры эпидемиологии и микробиологии Государственного учреждения образования «Белорусская...
У родильниц. Белорусская медицинская академия после iconРеспублики Беларусь Белорусская медицинская академия последипломного образования белорусский государственный медицинский университет
Рекомендовано в качестве учебно – методического пособия учебно – методическим советом гуо «Белорусская медицинская академия последипломного...
У родильниц. Белорусская медицинская академия после iconРеспублики Беларусь Белорусская медицинская академия последипломного образования
Учреждения-разработчики: Белорусская медицинская академия последипломного образования
У родильниц. Белорусская медицинская академия после iconИ эффекты его недостаточности о. А. Жигальцова гуо белорусская медицинская академия после
А1ат – низкомолекулярный белок, гликопротеин, относится к семейству сериновых протеаз, серпинов, содержит метионин в активном центре....
У родильниц. Белорусская медицинская академия после iconОглавление пояснительная записка
«Белорусская медицинская академия последипломного образования», кандидат медицинских наук, доцент А. А. Гончар
У родильниц. Белорусская медицинская академия после iconПрименение лазерной сварки в ортопедической стоматологии (клинико-экспериментальное исследование)
Оппонирующая организация Белорусская медицинская академия последипломного образования
У родильниц. Белорусская медицинская академия после iconЦервикальная эктопия в современной гинекологической практике: оптимизация клинического течения и лечение
Белорусская медицинская Академия последипломного образования, кафедра акушерства и гинекологии
У родильниц. Белорусская медицинская академия после iconУчебно-методическое пособие Утверждено
Государственное учреждение образования «Белорусская медицинская академия последипломного образования»
У родильниц. Белорусская медицинская академия после iconЭхопельвиоскопия в диагностике перитонеального фактора бесплодия Воскресенский С. Л
...
У родильниц. Белорусская медицинская академия после iconУчреждение образования «белорусская государственная сельскохозяйственная академия» Кафедра ботаники и физиологии растений
Сельскохозяйственная микробиология: Методические указания к лабораторным занятиям /Белорусская государственная сельскохо-зяйственная...
Разместите кнопку на своём сайте:
Библиотека


База данных защищена авторским правом ©lib.znate.ru 2014
обратиться к администрации
Библиотека
Главная страница