Клинико-диагностическое и прогностическое значение индукторов апоптоза-каспазы 9 и sfas-l в лечении больных хроническим миелолейкозом гливеком




Скачать 320.88 Kb.
НазваниеКлинико-диагностическое и прогностическое значение индукторов апоптоза-каспазы 9 и sfas-l в лечении больных хроническим миелолейкозом гливеком
страница1/3
Дата17.10.2012
Размер320.88 Kb.
ТипАвтореферат
  1   2   3


На правах рукописи


Накстхоева Эсет Башировна


КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ И ПРОГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ИНДУКТОРОВ АПОПТОЗА-КАСПАЗЫ 9 И sFAS-L В ЛЕЧЕНИИ БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ МИЕЛОЛЕЙКОЗОМ ГЛИВЕКОМ

14.01.04– внутренние болезни


АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание учёной степени

кандидата медицинских наук


Астрахань – 2012

Работа выполнена в ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации


Научный руководитель кандидат медицинских наук, доцент

Заклякова Людмила Владимировна


Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор

Каменев Виктор Фёдорович


доктор медицинских наук, профессор

Панов Анатолий Анатольевич



Ведущая организация: Государственное бюджетное

образовательное учреждение высшего

профессионального образования

«Волгоградский государственный

медицинский университет»

Министерства здравоохранения и

социального развития Российской

Федерации


Защита состоится « ___ » _________ 2012 г. в ___ часов на заседании диссертационного совета Д 208.005.01 при ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (414000 г. Астрахань, ул. Бакинская, 121)


С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации


Автореферат разослан « ___ » ___________ 2012 г.


Учёный секретарь

диссертационного совета Д 208.005.01

кандидат медицинских наук, доцент Л.В. Заклякова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ


Актуальность темы исследования


Хронический миелолейкоз (ХМЛ) – первое клональное миелопролиферативное заболевание, при котором была выявлена генетическая поломка, приводящая к его развитию - реципрокная транслокация t(9;22)(q34;q11.2) с образованием дериватной хромосомы der(22) t(9;22) с укороченным плечом – филадельфийской или Ph-хромосомы.

Доказано, что развитие ХМЛ и опухолевый рост являются результатом дисбаланса между пролиферацией клеток и программированной клеточной смертью (Барышников А.Ю., 2001; Бондарева В.А., 2007; Козлов А.В. и др., 2010). До настоящего века ХМЛ был фатальным заболеванием с неминуемым прогрессированием болезни и низкой выживаемостью. Только трансплантация костного мозга позволяла достичь относительно длительной ремиссии. В то же время, несмотря на установление множества существенных патогенетических деталей, удовлетворительной общей концепции патогенеза хронического миелолейкоза не существовало (Райхлин Н.Т 1996, Соколовская А.А. 2003, Rowan S. 1997).

Расшифровка молекулярно - генетических механизмов ХМЛ дала ключ к пониманию, что лишь медикаментозная элиминация Ph-позитивного клона и восстановление нормального Ph-негативного гемопоэза могут привести к длительной ремиссии и увеличению выживаемости больных (Волкова М.А. 2007, Домрачева Е.В. 2005). Появление препаратов, ингибирующих тирозинкиназы (ИТК), играющих основную роль в развитии ХМЛ, коренным образом изменило тактику его лечения, сделав терапию патогенетически направленной. Это позволило получить полные гематологические, цитогенетические, молекулярные ответы, в несколько раз увеличить выживаемость, снизить ежегодную летальность уже при применении первого ингибитора тирозинкиназ – гливека (Imatiniba mesylat, STI 571, «Novartis Pharma AG», Швейцария). Однако, ряд проблем, связанных с оптимизацией эффективности лечения гливеком, остаются не решенными. В связи с этим представляется интересным изучение вопросов апоптоза у больных ХМЛ, получающих лечение гливеком. Клинических работ по определение маркеров – индукторов апоптоза каспазы 9 и sFas – лиганда у больных хроническим миелолейкозом нет. Таким образом, работа является актуальной как в теоретическом плане, так и для практического здравоохранения.


Связь темы исследования с планом научных работ ГБОУ ВПО АГМА

Тема диссертационной работы является фрагментом комплексной темы: «Современные аспекты диагностики, мониторинга лечения и прогноза у больных хроническим миелолейкозом в отдельных популяциях Южного Федерального округа», номер госрегистрации - 01201000902, протокол №45 Центральной проблемной комиссии от 26.10.2009 г., утверждена на Учёном совете 09.12.2009 г.

Комплексная тема выполняется в рамках Проблемы ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздравсоцразвития России: «Белки-маркёры и молекулярные основы патологических процессов», Код ГРНТИ 31.27.03.


Цель исследования


Определить клинико-диагностическое и прогностическое значение индукторов апоптоза каспазы 9 и sFas-L в лечении больных хроническим миелолейкозом гливеком.


Задачи исследования

  1. Провести анализ достижения клинических ответов в стандартные сроки, цитогенетических и молекулярных ответов в сроки 24, 30, 36 месяцев терапии гливеком у больных ХМЛ

  2. Выявить влияние предлеченности, прогностического риска по J.Sokal на достижение у больных ХМЛ положительных результатов

3. Определить концентрацию каспазы 9 и sFas-L в сыворотке крови в контрольной группе здоровых доноров

4. Дать клиническое толкование взаимосвязи концентрации каспазы 9 в сыворотке крови и достижения цитогенетических и молекулярных ответов у больных ХМЛ на 24, 30, 36 месяцев терапии гливеком

5. Определить клинико - диагностическое и прогностическое значение концентрации индуктора апоптоза - sFas-L в сыворотке крови у больных ХМЛ на 24, 30, 36 месяцев терапии гливеком в достижении цитогенетических и молекулярных ответов


Научная новизна исследования

Впервые определены нормальные значения концентрации индукторов апоптоза - каспазы 9 и sFas-L в сыворотке крови у здоровых лиц Астраханской области и у больных ХМЛ в общей группе.

Доказано патогенетическое влияние концентрации индукторов апоптоза - каспазы 9 и sFas-L на достижение оптимального, полного цитогенетического и большого/полного молекулярного ответов.

Впервые определена прогностическая значимость низких и высоких концентраций каспазы 9 и sFas-L у больных на поздних этапах терапии гливеком (30-36 месяцев), отражающих наличие или отсутствие Ph-положительного клона.


Практическая ценность исследования

Пролонгация терапии гливеком с увеличением дозы до 600 мг в сутки при недостижении оптимального ответа к 18 месяцам способствует увеличению количества ПЦО, БМО/ПМО на срок мониторинга до 36 месяцев.

Установлено, что сокращение сроков предлеченности у больных ХМЛ ведет к улучшению результатов терапии гливеком к сроку 36 месяцев: в группе с ОпО срок предлеченности в 2 раза ниже по сравнению с группой неудачи терапии; в группе больных с достижением БМО/ПМО тенденция аналогичная.

Доказано, что высокий риск прогноза ХМЛ по J. Sokal достоверно снижает количество ОпО, ПЦО, БМО/ПМО.

Повышенная концентрация индукторов апоптоза каспазы 9 и sFas-L в поздние сроки лечения - (30 - 36 месяцев) имеет положительное значение и ассоциируется с достижением ПЦО, БМО/ПМО.

Снижение концентрации индукторов апоптоза каспазы 9 и sFas-L в сроки лечения 30 - 36 месяцев исключает возможность достижения ПЦО, БМО/ПМО.

Личный вклад автора

Лично автором исследования выполнено теоретическое обоснование темы работы; проведено изучение всей первичной медицинской документации; заполнены тематические карты на каждого больного; сформулированы критерии включения и исключения больных хроническим миелолейкозом в группу обследуемых лиц; сформированы группы сравнения; проведена систематизация, статистическая обработка с применением компьютерной технологии и соответствующего программного обеспечения (прикладной пакет STATISTIKA-7, Microsoft Exel); проведёны анализ результатов, их теоретическое обоснование и внедрение лечебную практику.

Внедрение результатов исследования: результаты исследования внедрены в практику работы гематологической службы ГУЗ «Александро - Мариинская областная клиническая больница» г. Астрахани, в педагогический процесс на кафедре факультетской терапии и профессиональных болезней с курсом последипломного образования


Основные положения диссертации, выносимые на защиту

1. У части больных ХМЛ эффективность терапии гливеком меняется в контрольных точках мониторинга (18, 24, 30, 36 месяцев терапии) в связи с развитием первичной или вторичной резистентности к препарату

2. На поздних сроках мониторинга (30-36 месяцев) выявлено, что на эффективность терапии больных ХМЛ гливеком влияют сроки предлеченности и риск прогноза заболевания по J.Sokal

3. Концентрация каспазы 9 и sFas-L в сыворотке крови отражает на изученных сроках мониторинга (24-36 месяцев терапии гливеком) патогенез ХМЛ (наличие или отсутствие Ph+ клона)

4. Увеличение количества ПЦО и БМО/ПМО на 30-36 месяцев терапии (медикаментозно индуцированное повышением дозы гливека) ассоциировано с активацией апоптоза по каспазозависимому и Fas-зависимому путям

5. Выявлено клинико-диагностическое и прогностическое значение концентрации в сыворотке крови каспазы 9 и sFas-L при достижении цитогенетических и молекулярных ответов


Публикации и апробация работы

Основные положения диссертации доложены и представлены на конференции «Лекарство и здоровье человека» (г. Астрахань, 2011г.), на научных итоговых научных сессиях АГМА (2010, 2011 гг.), на 7-й международной научно-практической конференции «Достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины» (Астрахань, 2010); конференции «Белки - маркеры» (г. Астрахань, 2011г.). По материалам диссертации опубликовано 14 научных работ, в т.ч. 3 работы в рецензируемых научных журналах, рекомендованных ВАК РФ.

Апробация работы проведена на объединенном заседании кафедр ГБОУ ВПО АГМА Минздравсоцразвития России.


Структура работы

Диссертация изложена на 150 страницах машинописного текста, состоит из введения, литературного обзора, 5 глав, содержащих результаты собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций. Список литературы включает в себя 87 отечественных и 123 зарубежных источников. Работа иллюстрирована 21 таблицей, 24 рисунками, 6 клиническими примерами.


СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования

Обследовано 54 больных хроническим миелолейкозом, находившиеся на лечении в поликлинике и гематологическом отделении ГУЗ «Александро-Мариинская областная клиническая больница» г. Астрахани, в отделении гематологии ГУЗ «Волгоградский областной клинический онкологический диспансер №1» в период с 2007 по 2010 гг. Контрольную группу составили 30 практически здоровых доноров, сопоставимых по возрасту и полу с больными ХМЛ.

Критерии включения в исследование:

- пациенты, получающие терапию гливеком сроком от 18 до 36 месяцев; пациенты, находившиеся на момент начала терапии гливеком в хронической фазе; пациенты, у которых диагноз ХМЛ был подтвержден цитогенетическим и молекулярно-генетическим исследованием (количественное определение экспрессии химерного гена BCR-ABL типа р210).

Критерии исключения из исследования:

- наличие в качестве сопутствующей патологии заболеваний, при которых может повышаться титр каспазы 9 и sFas-L: сахарный диабет, заболевания соединительной ткани, системные васкулиты, заболевания сердечно-сосудистой системы, онкозаболевания.

Всем больным при диагностике заболевания и мониторинге терапии гливеком проводились: исследование общего анализа крови, миелограмм, стандартное цитогенетическое исследование (СЦИ), флуоресцентная in situ гибридизация (FISH), количественная оценка экспрессии химерного гена BCR-ABL типа р210 методом ПЦР в режиме реального времени.

Статистическая обработка данных проводилась при помощи статистической программы STATISTICA 7. Для каждого показателя и групп наблюдения вычисляли среднее значение, ошибку средней арифметической. Для проверки статистических гипотез при сравнении числовых данных двух не связанных групп использовали U-критерий Манна - Уитни. Учитывая небольшой объем наблюдений, при статистических расчетах использовались формулы для малых групп.

Все пациенты на 18 месяцев лечения были разделены на 3 группы в зависимости от ответа на лечение согласно критериям ELN – 2009: группа 1- оптимальный ответ (ОпО), группа 2 - субоптимальный ответ (СО), группа 3 - неудача терапии (НТ). В зависимости от результатов цитогенетического и молекулярного ответов на последующие контрольные точки 24, 30, 36 месяцев больные разделились на 2 группы: 1. Больные с наличием полного цитогенетического и большого/полного молекулярного ответов согласно критериям ELN -2009. 2. Больные без достижения ПЦО, БМО/ПМО (у которых Ph - хромосома больше 0% и транскрипт гена BCR/ABL больше 0,1%).

Пациенты, вошедшие в исследование, по гендерному признаку распределились следующим образом: мужчин - 24 (45,28%) женщин - 29 (54,72%). Средний возраст больных на момент диагностики составил 52,09±1,72.

Из 54 больных ХМЛ - 52 имели предлеченность различными препаратами.

Анализируя таблицу 1, можно сделать вывод, что срок предлеченности влияет на результат терапии гливеком: в группе с ОпО срок предлеченности в 2 раза ниже, чем в группе с неудачей терапии.

Таблица 1

Сравнительная характеристика ответа на лечение в зависимости от срока предлеченности на 18 месяцев терапии гливеком



Показатель

ОпО

n = 20

СО

n = 4

НТ

n = 29

Срок предлеченности (мес)


15,57±5,05


11,98±8,96

(p2<0,01)


28,63±5,65

(p1<0,01)

(p2<0,01)


Примечание:

различия показателей значимы (p1<0,01) группы ОпО и НТ; различия показателей значимы (p2<0,01) группы СО и НТ

Проведённый нами анализ показал такую же статистически значимую тенденцию и в группе больных, достигших ПЦО и БМО/ПМО, по сравнению с группой, где отсутствовали данные ответы.

Согласно критериям ELN-2009, через 18 месяцев лечения гливеком у больных ХМЛ должен быть достигнут оптимальный ответ. Предиктором благоприятного прогноза является не только получение хорошего цитогенетического и молекулярного ответов, но и его раннее достижение. На рисунках 1, 2, 3, 4 представлен мониторинг терапии гливеком в исследуемой группе больных ХМЛ. В связи отсутствием на 18 месяцев у 29 (54,72%) больных ответа на лечение (НТ) и отсутствие возможности перевода больных на ИТК второго поколения, доза гливека была увеличена до 600 мг в сутки. Дальнейший анализ (24-30-36 месяцев) показал, что пролонгация терапии гливеком с увеличением его дозы до 600 мг увеличивает количество достижения ПЦО и БМО/ПМО.




Рис.1.Мониторинг через Рис.2. Мониторинг через

18мес. лечения 24 мес. лечения




Рис. 3. Мониторинг через Рис.4. Мониторинг через

30 мес. лечения 36 мес. лечения

Соответственно в каждые сроки мониторинга снизился процент частичного и малого цитогенетического ответов на лечение гливеком (Рис.5).




Рис.5. Мониторинг цитогенетического ответа на терапию гливеком у больных ХМЛ

У всех больных параллельно осуществлялся забор периферической крови для исследования маркеров индукции апоптоза – растворимого Fas-лиганда (sFas-L) и каспазы 9. Концентрацию sFas-L и каспазы 9 в сыворотке крови определяли методом твердофазного анализа (ИФА) при помощи наборов реагентов sFas-L и каспазы 9 (ELISA) фирмы Bender MedSystems (Австрия), используя аппаратуру (Universal Microplate Reader, Auto Strip Waiher , VORTEMP BIO-TEK INSTRUMENTS, INC).


РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
  1   2   3

Похожие:

Клинико-диагностическое и прогностическое значение индукторов апоптоза-каспазы 9 и sfas-l в лечении больных хроническим миелолейкозом гливеком iconПатогенетическое и клинико диагностическое значение индукторов апоптоза каспазы 9 и fas L в плановом достижении ответа на терапию гливеком у больных хроническим миелолейкозом
Патогенетическое и клинико диагностическое значение индукторов апоптоза каспазы 9 и fas-l в плановом достижении ответа на терапию...
Клинико-диагностическое и прогностическое значение индукторов апоптоза-каспазы 9 и sfas-l в лечении больных хроническим миелолейкозом гливеком iconДиссертации, защищённые сотрудниками, аспирантами и соискателями кафедры
Диагностическое и прогностическое значение иммунологических и биохимических показателей крови и ликвора у больных опухолями головного...
Клинико-диагностическое и прогностическое значение индукторов апоптоза-каспазы 9 и sfas-l в лечении больных хроническим миелолейкозом гливеком iconКлинико-микробиологическое и фармакокинетическое обоснование обследования и лечения больных хроническим бактериальным простатитом (Клинико-экспериментальное исследование)
Работа выполнена в фгу нии урологии Росмедтехнологий и Городской клинической урологической больнице №47 Департамента Здравоохранения...
Клинико-диагностическое и прогностическое значение индукторов апоптоза-каспазы 9 и sfas-l в лечении больных хроническим миелолейкозом гливеком iconКлинико-прогностическое значение оценки функционально-метаболической активности лейкоцитов, среднемолекулярных пептидов, системы про-антиоксидантной защиты крови у больных вич-инфекцией
Работа выполнена в Кабардино-Балкарском Государственном университете им. Х. М. Бербекова Федерального агентства по образованию и...
Клинико-диагностическое и прогностическое значение индукторов апоптоза-каспазы 9 и sfas-l в лечении больных хроническим миелолейкозом гливеком iconКлинико-диагностическое значение определения антител к глутатионредуктазе и супероксиддисмутазе у больных системной склеродермией с использованием иммобилизированных форм ферментов (14.
Но-исследовательском институте клинической и экспериментальной ревматологии рамн, Государственном бюджетном образовательном учреждении...
Клинико-диагностическое и прогностическое значение индукторов апоптоза-каспазы 9 и sfas-l в лечении больных хроническим миелолейкозом гливеком iconПоддержание вертикальной позы: анатомо-физиологические аспекты, методы регистрации, клинико-диагностическое значение нарушений. Резюме
Поддержание вертикальной позы: анатомо-физиологические аспекты, методы регистрации, клинико-диагностическое значение нарушений
Клинико-диагностическое и прогностическое значение индукторов апоптоза-каспазы 9 и sfas-l в лечении больных хроническим миелолейкозом гливеком iconКомплексная диагностика и комбинированное лечение больных хроническим рецидивирующим увеитом с применением экстракорпоральной гемокоррекции
Комплексная диагностика и комбинированное лечение больных хроническим рецидивирующим увеитом
Клинико-диагностическое и прогностическое значение индукторов апоптоза-каспазы 9 и sfas-l в лечении больных хроническим миелолейкозом гливеком iconВиктория Александровна клинико-диагностическое значение дисфункции эндотелия при сахарном диабете 1 типа у детей
Етном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Читинская государственная медицинская академия» Министерства...
Клинико-диагностическое и прогностическое значение индукторов апоптоза-каспазы 9 и sfas-l в лечении больных хроническим миелолейкозом гливеком iconДиагностическое значение цитоморфологических, культуральных и иммуногенных свойств trichomonas vaginalis
Диагностическое значение цитоморфологических, культуральных и иммуногенных свойств
Клинико-диагностическое и прогностическое значение индукторов апоптоза-каспазы 9 и sfas-l в лечении больных хроническим миелолейкозом гливеком iconКлиническое значение состояния интралейкоцитарной микробицидной системы лейкоцитов периферической крови у детей, больных острым и хроническим пиелонефритом
Работа выполнена в Хабаровском филиале Учреждения Российской академии медицинских наук Дальневосточного научного центра физиологии...
Разместите кнопку на своём сайте:
Библиотека


База данных защищена авторским правом ©lib.znate.ru 2014
обратиться к администрации
Библиотека
Главная страница