Научно-исследовательский институт биологии




НазваниеНаучно-исследовательский институт биологии
страница4/21
Дата30.09.2012
Размер2.06 Mb.
ТипТезисы
1   2   3   4   5   6   7   8   9   ...   21

8-Окси-2'-дезоксигуанозин как биомаркер старения в цитогеронтологических экспериментах – можем ли определить?

Д.С. Есипов1, Е.В. Сидоренко1, Т.А. Горбачева1, А.В. Селифанов2, В.В. Бессонов2, О.В. Коршикова1, Г.А. Хайруллина1, А.Н. Хохлов1

1Кафедра биоорганической химии и сектор эволюционной цитогеронтологии биологического факультета МГУ им. М.В. Ломоносова

2ГУНИИ питания РАМН

г. Москва, Россия

E-mail: desipov@gmail.com

8-Окси-2'-дезоксигуанозин (8-одГ) является наиболее распространенным окислительным повреждением ДНК. В силу того, что количество его при старении in vivo и in vitro непрерывно увеличивается как в ядерной, так и в митохондриальной ДНК (причем в последней – с гораздо более высокой скоростью), многие геронтологи (особенно стоящие на позициях свободнорадикальной теории старения) считают его одним из лучших молекулярных биомаркеров старения. Существует несколько обладающих разной чувствительностью методов определения количества 8-одГ в ДНК различных тканей организмов (иммуноферментный метод, аффинная хроматография, хроматография с масс-спектрометрией или электрохимической детекцией). Некоторые из них позволяют проводить такую оценку даже в цитогеронтологических экспериментах, т.е. в культивируемых клетках (в этом случае на первое место выходит проблема количества получаемого в конкретном эксперименте клеточного материала), однако стоимость этих методов достаточно высока и, как правило, нереальна для многих лабораторий. Мы попытались наладить метод определения количества 8-одГ в ДНК культивируемых клеток с использованием относительно недорогих реактивов и оборудования и оценить, сможем ли мы таким методом проводить исследования "стационарного старения" клеточных культур и тестировать на них геропротекторы-антиоксиданты. Нами был выбран метод хроматографического анализа количества 8-одГ в ДНК с УФ- и электрохимической детекцией. Анализ проводили на хроматографе "Gold" (Beckman Coulter, США) при длине волны 254 нм. Для определения 8-одГ использовали электрохимический детектор фирмы "Химавтоматика" (Россия). Анализ проводили с напряжением на электроде +0,4 В. Свидетель для калибровки детектора синтезировали из 2'-дезоксигуанозина (ДГ) в присутствии 20 мМ ЭДТА, 20 мМ аскорбиновой кислоты и 2 мМ FeSO4 при 37 ОС, пропуская воздух через раствор в течение 3 ч. Выделение и очистку 8-одГ проводили с помощью полупрепаративной обращено фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии. Структуру полученного соединения подтверждали УФ- и ЯМР спектроскопией и масс-спектрометрией. Отметили, что при хранении 8-одГ в растворе при комнатной температуре он с заметной скоростью гидролизуется до 8-оксигуанина. С помощью синтезированного свидетеля было определено минимальное количество (не более 5 пикомолей) 8-одГ, которое возможно достоверно обнаружить в наших условиях. Таким образом, принимая во внимание, что обычно соотношение 8-одГ : ДГ составляет приблизительно 1 : 105, для анализа необходимо выделять ДНК из 108 клеток. Этого же количества клеток нам должно хватить для определения количества выделяемого при "стационарном старении" в ростовую среду 8-оксигуанина.


ПРОДОЛЖИТЕЛЬНОСТЬ ЖИЗНИ И ИНТЕЛЛЕКТ ЧЕЛОВЕКА: ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ УКРАИНСКОЙ ПОПУЛЯЦИИ

О.В. Филипцова1, Л.А. Атраментова2

1Национальный фармацевтический университет

2Харьковский национальный университет им. Каразина
г. Харьков, Украина

Одно из первых лонгитюдных исследований влияния уровня интеллекта на продолжительность жизни было начато в 20-е гг. ХХ в. американским ученым Л. Терманом. Было показано, что высокоинтеллектуальные люди обладали рядом преимуществ, способствовавших поддержанию здоровья, но однозначной связи между заболеваемостью, смертностью и уровнем IQ найдено не было [Friedman H.S. et al., 2003]. В то же время другими исследователями была обнаружена положительная корреляция между уровнем IQ и долгожительством [Brand C., 1987], способностью обслуживать себя без посторонней помощи [Snowdon D.A. et al., 1989], более поздним развитием болезни Альцгеймера [Snowdon D.A. et al., 1996], более высокой физической подвижностью, координацией рук и силой хватки руки, остротой зрения, меньшим количеством умственных нарушений [Snowdon D.A. et al., 1989]. Проводятся также молекулярно-генетические исследования возможной связи между старением и IQ [Skuder P. et al., 1995; Joseph J.A., 1992]. Украина – самостоятельное государство с собственной историей, но подобные популяционные исследования в ней отсутствуют, что и определяет актуальность данной работы.

Известно, что наследуемость интеллекта довольно высокая [Plomin R., 2003] и между родственниками существует положительная корреляция по IQ. Продолжительность жизни, как показано в ряде исследований, также генетически обусловлена [Lewis R., 1995]. Целью нашей работы было изучение связи между уровнем IQ внуков и продолжительностью жизни их бабушек и дедушек по материнской и отцовской линиям. Средний возраст внуков составил 22,8 лет (половое соотношение 45 % мужчин и 55 % женщин). Обнаружены умеренные отрицательные корреляции между уровнем IQ внуков и продолжительностью жизни их бабушек по обеим линиям и дедушек по материнской линии (r = -0,22, -0,30 и -0,19 соответственно) и высокая корреляция между уровнем IQ внуков и продолжительностью жизни их дедушек по отцовской линии (r=0,90). При изучении связи между вредными привычками (курение и употребление алкоголя) мы не выявили никаких корреляций между возрастом начала курения, частотой употребления спиртных напитков и уровнем IQ внуков. Однако обнаружена высокая положительная корреляция между IQ и числом выкуриваемых сигарет (r=0,58). Полученные результаты оказались неожиданными и изучение причин подобной ситуации мы видим в дальнейшей исследовательской работе.


ПИРАМИДЫ, ЗДОРОВЬЕ, СТАРЕНИЕ И ДОЛГОЛЕТИЕ

Г.Д. Бердышев

Киевский национальный университет имени Тараса Шевченко

г. Киев, Украина

Е-mail: Berd@biochem.kiev.ua; www.ultra-ray.com

Пирамиды – одно из древних чудес света – по-прежнему скрывают в себе много тайн и загадок, одна из которых – повышение здоровье и замедление старения живых организмов в пирамиде. Разгадка этой тайны связана с раскрытием природы физической энергии пирамиды. Существуют десятки гипотез о физической природе энергии пирамид – от оргонной и интертонной до торсионной. Недавно мы закончили изучение андронной природы энергии, возникающей в результате вибрации протонов и нейтронов в атомном ядре и концентрирующейся в пирамидах [Адаменко А.А., Бердышев Г.Д. Пирамиды: история, современное состояние и перспективы использования //Физика сознания и жизни, космология и астрофизика. – 2005. – Т. 5.- № 3. – С. 26-36]. В настоящее время учение о пирамидах отряхивает с себя шелуху мифов и легенд о пирамидах, постепенно превращаясь в рациональную науку со своими методами познания, с тысячелетней историей, объектом и предметом исследований.

Настоящая работа посвящена изучению электромагнитной природы энергии пирамид, в частности, влиянию электромагнитных полей (ЭМП) на здоровье, старение, заболеваемость и смертность линейных мышей. Наша планета является гигантскими электромагнитом, по поверхности которого движутся электромагнитные волны, рассеиваясь на любом препятствии – стволах и кронах деревьев, стенах пещер и деревянных домов, колонах и куполах храмов, дольменов, обелисках и мегалитах. Эволюционное формирование человека от обезьяны до Homo sapiens проходило в лесах, которые были раем для Адама и Евы, так как были наполнены слабыми рассеянными ЭМП. Изгнание из рая людей произошло тогда, когда они стали строить железобетонные дома и ездить на железном транспорте. Человек стал испытывать хронический электромагнитный голод, чувствовать себя некомфортно, болеть, ускоренно стареть. Пребывание в полых пирамидах – концентраторах рассеянных ЭМП оздоровляет человека, замедляет старение, продлевает его долголетие.

С целью проверки этих теоретических предпосылок, нами проведено экспериментальное исследование на четырёх группах мышей (самцов и самок, каждая группа разделена по полу на две подгруппы). Животные обитали в обычных лабораторных условиях. Лаборатория представляла собой деревянное строение без железной крыши, экранизация ЭМП в ней отсутствовала. Первая группа мышей от рождения до смерти содержалась в железных клетках (клетках Фарадея). Вторая группа (контроль) обитала в обычных клетках из диэлектриков; третья группа находилась в постоянных сильных ЭМП, а четвёртая группа – в полой пирамиде, изготовленной из диэлектриков (дерева и фанеры). Сравнивали их состояние здоровья, скорость развития и старения, заболеваемость, смертность мышей. Первая и третья группы хуже росли и развивались, быстрее старели, заболевали и умирали по сравнению с контролем. Пирамидальные мыши четвёртой группы по сравнению с ними быстрее росли, медленнее старели, меньше болели, на 30 % жили дольше, чем в контроле. Половинной разницы в их выживаемости не обнаружено. Сделан вывод о том, что млекопитающие для своего нормального роста и развития нуждаются в слабых рассеянных ЭМП, которые присутствуют в природе и возникают в полых пирамидах.


БИОХИМИЧЕСКИЕ И ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ МЕХАНИЗМЫ ОНТОГЕНЕЗА


ВОЗРАСТНЫЕ И ЛИЧНОСТНЫЕ ОСОБЕННОСТИ МЕХАНИЗМОВ ВЕГЕТАТИВНОЙ РЕГУЛЯЦИИ ПРИ ЭМОЦИЯХ

Н.А. Прокопенко

Институт геронтологии АМН Украины

г. Киев, Украина

E-mail: naprok@bigmir.net

Эмоции в структуре психики человека относятся к психическим процессам, обеспечивающим первичное отражение и осознание личностью воздействий окружающей действительности. Все связанные с эмоциями явления являются результатом активности определенных отделов мозга. Воздействие эмоциогенных факторов нарушает гомеостаз гормональной и вегетативной нервной систем. При этом изменяется ритм сердечных сокращений, уровень артериального давления, частота дыхания. Характеристика этих изменений тесно связана с особенностями личности данного человека. Личность интегрирует в своем составе и темпераментные и характерологические свойства человека.

Исследование посвящено изучению механизмов регулирования физиологических функций организма при воздействии эмоциогенных факторов на основе концепции интегральной индивидуальности. Для физиологического контроля над функциональным состоянием человека во время эмоциональных проб применялся анализ вариабельности сердечного ритма (временной и спектральный). Этот метод позволяет количественно охарактеризовать активность различных отделов вегетативной нервной системы через их влияние на функцию синусового узла, которое проявляется в колебаниях длительности RR-интервалов. При разделении испытуемых на группы учитывались следующие свойства индивидуальности: экстраверсия-интроверсия как темпераментный параметр, экстернальность-интернальность как зона локализации механизмов самоконтроля, экстрапунитивность-интропунитивность как характерологический признак в ситуациях фрустрирования.

Как показали результаты исследования значительные различия во взаимосвязи показателей вариабельности сердечного ритма и свойств названных уровней индивидуальности выявлены при моделировании отрицательных эмоций. При этом у интровертов и у испытуемых при интропунитивном типе реагирования наблюдалась одинаковая направленность изменений показателей вариабельности сердечного ритма по сравнению с исходным состоянием: уменьшались SDNN, RMSSD, триангулярный индекс и мощность в HF-диапазоне, рос индекс Баевского. Это может свидетельствовать об изменении вегетативного баланса в виде активации симпатоадреналового звена и напряжении регуляторных систем. Такие закономерные изменения показателей вариабельности сердечного ритма аналогичны изменениям этих показателей при старении.

Проведенное исследование показало, что особенности эмоционального склада личности, которые определяются не только врожденными свойствами нервной системы, но и теми условиями, которые формируют системы эмоциональных отношений, играют большую роль в укреплении здоровья и профилактике нейрогенных заболеваний.


Онтогенетическая зависимость регуляции факторами роста репродуктивных мужских функций

А.И. Гладкова

Институт проблем эндокринной патологии им. В.Я. Данилевского АМН Украины

г. Харьков, Украина

E-mail: ipep@vl.kharkov.ua

История изучения факторов роста (ФР) началась с ингибина (ныне отнесенного к семейству трансформирующих ФР-бета). В настоящее время ФР принадлежит ведущая роль в ауто- и паракринной регуляции яичка. Практически все ФР прямо или опосредованно (через андрогены или гонадотропины) влияют на гормональную продукцию и сперматогенез.

В эмбриональном периоде развитие внутренних и наружных половых органов, а затем и вторичных половых признаков контролируется антимюллеровым гормоном (АМГ) наряду с тестостероном и инсулиноподобным ФР (ИФР). АМГ вызывает регрессию Мюллерова протока у плодов мужского пола. Высокую активность в эмбриональном периоде обнаруживает также трансформирующий ФР-альфа (ТФРα), который стимулирует клеточную пролиферацию и тканевой морфогенез. ФР фибробластов (ФРФ) участвует в половой дифференциации мозга, снижение содержания одной из его форм вызывает приостановку развития яичка и препятствует появлению мужского фенотипа.

Выраженная возрастная зависимость уровней ФР, связанная и с функционированием гонад, свидетельствует об участии ФР в поддержании фертильности. Сложные отношения характерны для периода пубертата. АМГ участвует в трансформации гоноцитов и сперматогоний, тормозя до позднего пубертата вхождение половых клеток в мейоз и пролиферацию клеток Лейдига. Секрецию фолликулостимулирующего гормона перед началом пубертата модулирует ингибин. В период пубертата уровни ингибина возрастают параллельно содержанию обоих гонадотропинов и тестостерона. ИФР регулирует экспрессию стероидогенной функции, индуцирует сперматогонии и паракринно действует на другие типы герминативных клеток, обеспечивая их фертильные качества. Значение ТФРα снижается от раннего к позднему пубертату. В случае выраженного экспрессирования ТФРα наступает преждевременное половое созревание.

Пролиферация гонадальных клеток стимулируется ФРФ, ТФРα, ФР нервов, активином, стероидогенная – ИФР, ТФРα. Выраженным ингибитором всех типов клеток является ТФР-β1.

На этапах нисходящего онтогенеза уровень многих ФР снижается либо повышается содержание связывающих их белков. Такая зависимость прослежена, в частности, для ИФР, что обосновало его лечебное использование при возрастном снижении уровня тестостерона. У здоровых мужчин после 70 лет уровень ингибина падает параллельно со снижением активности клеток Сертоли и повышением уровня ФСГ.

Биологически снижение уровней большинства ФР в старших возрастных группах оправдано, так как к этому времени исчерпана функция размножения. Однако для ряда ФР в этот период онтогенеза объектом действия становится предстательная железа. Роль ФР для физиологических процессов в предстательной железе не исключается во все возрастные периоды. Но поскольку многие ФР являются сильными митогенами, то их активация ведет к пролиферации простаты. ФР нервов может быть стромально обусловленным медиатором эпителиально-клеточной пролиферации в простате. ФРФ-2 -митоген ангиогенеза и стромальных клеток, а ФРФ-7 – эпителиальных клеток. Поэтому ФРФ играют ведущую роль в патогенезе доброкачественной гиперплазии, а также простатической карциномы. Противостоит этим эффектам ТФР-β1, затормаживающий эпителиальный рост простаты, стимулированный андрогеном, а также активин, тормозящий пролиферацию предстательной железы, вызывая апоптоз опухолевых клеток.

Знание участия ФР в регуляции процессов размножения способствует коррекции соответствующих патологических проявлений.


ИЗМЕНЕНИЕ БИОСТРУКТУРЫ ТКАНЕЙ БЕЛЫХ КРЫС В ОНТОГЕНЕЗЕ

О.И. Галавина

НИИ биологии Харьковского национального университета имени В. Н. Каразина

г. Харьков, Украина

E-mail: Galavin@yandex.ru

Для выяснения фундаментальной причины старения следует обратиться к представлениям о природе и структуре живой материи. Э. С. Бауэр, сформулировавший принцип устойчивого неравновесия, характерного для живых организмов, пришел к выводу, что “молекулярная структура живой материи является неравновесной искривленной решеткой”, которая при умирании приобретает вид “недеформированной решетки ” [Бауэр, 1935]. Представление о том, что живое состояние определяется особой структурой развивается и в работах Е. М. Маковски, который создал теорию биоструктурированной материи. Он писал, что часть материи живой протоплазмы интегрирована в особую свойственную только живому структуру, которую он назвал биоструктурой, а другая часть является внутриклеточным интрацеллюлярным раствором. Биоструктура существует только в живой протоплазме и распадается при её умирании. Им было показано, что в состав биоструктуры входит связанная вода. Существование и целостность биоструктуры зависит от притока энергии, и при введении ингибиторов метаболизма происходит частичный распад биоструктуры и, вследствие этого, увеличение количества свободной воды [Маковски, 1976]. Эти представления согласуются с взглядами Сент-Дьердьи, который придавал исключительное значение структурированной воде. Он считал, что “живое вещество является как бы системой из воды и органического вещества, которое составляет одну единую неразделимую единицу - систему. Биологические функции могут фактически заключатся в образовании и нарушении водной структуры; вода – неотъемлемая часть живой машины, а не просто её среда; водные структуры и их взаимодействия с электронными возбуждениями тесно связаны с самой сущностью живого состояния” [Сент-Дьердьи, 1960].

В связи с выше сказанным представлялось интересным выяснить как изменяется содержание связанной воды в онтогенезе.

Опыты проводили на белых крысах линии Вистар в возрасте 1, 3, 12 и 24 месяца. Связанную воду определяли в тканях мозга, диафрагмы, печени и кожи хвоста методом Окунцова – Маринчик (1964), используя растворы сахарозы разной концентрации. Навески тканей погружали в раствор сахарозы. Через 3 часа при помощи рефрактометра АББЕ определяли показатель преломления раствора и рассчитывали количество связанной воды.

Разность между водой перешедшей в 42 % и в 25 % раствор сахарозы представляет собой фракцию связанной воды, которая уменьшается в течение онтогенеза во всех исследованных тканях.

Такое снижение связанной воды может свидетельствовать как об уменьшении количества биоструктуры, так и о снижении состояния неравновесия биоструктуры при старении. Эти изменения биоструктуры, возможно, приводят к значительным возрастным изменениям поглощения воды тканями при погружении их в разбавленные растворы сахарозы (1,5 % и менее). Это поглощение значительно увеличивается в онтогенезе.

Таким образом, происходящее в онтогенезе уменьшение неравновесного состояния биоструктуры, т.е. увеличение энтропии является фундаментальной причиной старения. Можно предположить, что это необратимое изменение биоструктуры в онтогенезе вызывает широкий спектр адаптивных изменений. Именно такими изменениями возможно является происходящее в онтогенезе увеличение термостабильности ДНП и коллагена.

1   2   3   4   5   6   7   8   9   ...   21

Похожие:

Научно-исследовательский институт биологии iconМетодические указания му 1 2600-10
Микроб" Роспотребнадзора; Научно-исследовательский институт вирусологии им. Д. И. Ивановского рамн; фгун "Центральный научно-исследовательский...
Научно-исследовательский институт биологии iconТатарский научно-исследовательский институт сельского хозяйства научное обеспечение
Л. С. Трофимова, Е. П. Яковлева гну всероссийский научно-исследовательский институт кормов им. В. Р. Вильямса Россельхозакадемии,...
Научно-исследовательский институт биологии iconМетодические рекомендации по контролю качества и испытанию стыков наружных стеновых панелей крупнопанельных жилых домов одобрены секцией №2 Научно-технического совета
Научно-исследовательский институт строительных конструкции госстроя СССР научно-исследовательский институт строительного производства...
Научно-исследовательский институт биологии iconНаучно-исследовательская работа велась по госбюджетным темам, грантам и программам Минобразования России, грантам рффи, хоздоговорам.
Санкт-Петербургского государственного университета (унц) образуют математико-механический факультет, Научно-исследовательский институт...
Научно-исследовательский институт биологии iconГосударственное научное учреждение всероссийский научно-исследовательский институт
Ученого совета гну всероссийский научно-исследовательский институт охотничьего хозяйства и звероводства им профессора Б. М. Житкова...
Научно-исследовательский институт биологии iconВсероссийский научно-исследовательский институт метрологической службы (вниимс) рекомендация
Гуп "всероссийский научно-исследовательский институт метрологии им. Д. И. Менделеева"
Научно-исследовательский институт биологии iconМетодические рекомендации мр 6 0050-11
А. А. Горский, В. С. Степанов, О. В. Липатова), фбун санкт-Петербургский научно-исследовательский институт радиационной гигиены имени...
Научно-исследовательский институт биологии iconНаучное медицинское общество геронтологов и гериатров украины
Научно-исследовательский институт биологии харьковского национального университета имени В. Н. Каразина
Научно-исследовательский институт биологии iconУспехи современной биологии, 2005, том 125, №6, с. 567-578
Казахский научно-исследовательский институт онкологии и радиологии, Алматы, Казахстан
Научно-исследовательский институт биологии iconФгу «Государственный научно-исследовательский институт информационных технологий и телекоммуникаций»
Фгну государственный научно-исследовательский институт информационных образовательных
Разместите кнопку на своём сайте:
Библиотека


База данных защищена авторским правом ©lib.znate.ru 2014
обратиться к администрации
Библиотека
Главная страница