Министерство здравоохранения республики казахстан карагандинский государственный медицинский университет




НазваниеМинистерство здравоохранения республики казахстан карагандинский государственный медицинский университет
страница8/45
Дата17.04.2013
Размер2.71 Mb.
ТипДокументы
1   ...   4   5   6   7   8   9   10   11   ...   45

С. Б. Ахметова, С. Б. Касымова, Г. А. Абуова, А. Н. Жашкенова,

С. И. Трофимова, Ж. У. Мейрамова

ИЗУЧЕНИЕ АНТИМИКРОБНОЙ И ПРОТИВОТРИХОМОНАДНОЙ АКТИВНОСТИ ЭФИРНЫХ МАСЕЛ ARTEMISIA KAZAKORUM И ACHILLEA MICRANTHA ВЫДЕЛЕННЫХ ИЗ ФЛОРЫ КАЗАХСТАНА


Карагандинский государственный медицинский университет, КО ЦСЭЭ Бактериологическая лаборатория, (Караганда), РГКП КО ЦСЭЭ Бактериологическая лаборатория, (Жезказган)


Издавна известно, что эфирные масла обладают антибактериальными и противопаразитарными свойствами, отличаются высокой активностью и низкой токсичностью [1,2]. В связи с этим на кафедре микробиологии КГМУ совместно с сотрудниками лаборатории биоскрининга АО «НПЦ Фитохимия» исследованы эфирные масла лекарственных растений Artemisia kazakorum и Achillea micrantha на антимикробную и противопаразитарную активности в экспериментах in vitro.

Материалы и методы исследования. Изучение антимикробной активности эфирных масел проводилось по отношению к штаммам грамположительных бактерий Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, к грамотрицательным штаммам Escheriсhia coli, Pseudomonas aeruginosa и к грибам Сandida albicans методом диффузии в агар (лунок). Исследуемые образцы растворяли в 96 % этиловом спирте в концентрации 1 мг/мл. Препараты сравнения – гентамицин для бактерий и нистатин для дрожжеподобного грибка Сandida albicans.

Культуры выращивали на жидкой среде рН 7,3 ± 0,2 при температуре от 30 до 350С в течение 18-20 часов, культуру Сandida albicans – на плотной среде Сабуро рН 5,6 ± 0,2 при температуре от 20 до 250С в течение 48 часов. Культуры разводили 1:1000 в стерильном 0,9% растворе натрия хлорида изотоническом, вносили по 1 мл в чашки Петри с соответствующими элективными питательными средами для изучаемых тест-штаммов и засевали по методу «сплошного газона». После подсушивания на поверхности среды формировали лунки размером 6,0 мм, в которые вносили растворы исследуемых образцов, гентамицина, нистатина по 10 мкл, в контроле использовали 96% этиловый спирт в эквиобъемных количествах. Таким образом, исследуемые образцы испытывались в количестве 1 мкг, а препараты сравнения в количестве 1 мг. Посевы инкубировали при 370С, учет растущих культур проводили через 24 часа, а посевы с Сandida albicans при температуре от 20 до 25ºС в течение 48 часов. Антимикробная активность образцов оценивалась по диаметру зон задержки роста тест-штаммов (мм). Статистическую обработку проводили методами параметрической статистики с вычислением средней арифметической и стандартной ошибки.

Эксперименты на исследование противотрихомонадной активности представленных эфирных масел проводились на изолированных штаммах Trichomonas vaginalis. Штаммы трихомонад культивировали на питательной среде Павловской, содержащей в своем составе антибиотики для получения безбактериальной культуры. Трихомонадостатическую концентрацию (активную концентрацию) эфирных масел Artemisia kazakorum и Achillea micrantha определяли методом серийных разведений, в концентрации 0,5 мг/мл[6]. В качестве препарата сравнения использовали метронидазол в стандартной концентрации 1,9 мг/мл. Во всех случаях растворителем служил 3% раствор этанола (в серии экспериментов доказано, что данная концентрация не оказывает воздействия на жизнедеятельность и рост трихомонад). В качестве контроля использовали пробирки с растворителем в эквиобъемных количествах. В пробирку вносили точные навески эфирных масел, метронидазола, раствора этанола (исследуемые концентрации). После чего в ту же пробирку добавляли 5 мл питательной среды. Таким образом, получили исходное разведение определенных концентраций. Из него готовили ряд серийных разведений. К каждому разведению добавляли 0,3 мл исследуемой суспензии, содержащей по 1-3´304 трихомонад в 1 мл. Последняя пробирка – контроль – без добавления испытуемых веществ. Посевы инкубировали в термостате при 37ºС в течение 2-5 дней. Трихомонацидное действие эфирных масел определяли методом субкультур. После завершения предыдущего эксперимента из всех пробирок осуществляли пересев на свежую питательную среду. Посевы инкубировали при 37ºС в течение 7 дней. Количество простейших, их подвижность, наличие или отсутствие жгутиков оценивали так же в камере Горяева, трихомонацидной считалась минимальная концентрация, при которой рост простейших отсутствует как в культуре, так и в субкультуре.

Результаты и обсуждение. В результате исследования установлено, что все представленные образцы эфирных масел проявляют в основном умеренно-выраженное антимикробное действие как в отношении указанных штаммов бактерий, так и Candida аlbicans. Выраженное антибактериальное действие в отношении грамположительных бактерий - Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis показало эфирное масло Artemisia kazakorum и Achillea micrantha.

Результаты определения трихомонадостатической концентрации исследуемых эфирных масел, препарата сравнения метронидазола и контрольного 3% раствора этанола показали, эфирное масло Artemisia kazakorum в дозе 0,5 мг/мл показало умеренную трихомонадостатическую активность. Препарат сравнения метронидазол показал активность в стандартной концентрации 1,9 мг/мл. В контрольных пробирках во всех концентрациях активности не наблюдается.

Трихомонадоцидная активность эфирное масло Artemisia kazakorum в дозах 0,1; 0,25 и 0,5 мг/мл; контроль растворителя и препарата сравнения в стандартной концентрации 1,9 мг/мл. Активная концентрация испытуемых веществ высчитывалась путем подсчета пробирок, в которых рост трихомонад отсутствовал, эфирное масло Artemisia kazakorum проявило умеренную трихомонадоцидную активность в дозе 0,1 мг/мл в 70%, в дозе 0,25 мг/мл – в 80%, а в дозе 0,5 мг/ мл – в 90%; метронидазол при стандартной концентрации 0,5 мг/мл – в 100%. Контрольный 3% раствор этанола в эквивалентных концентрациях трихомонадоцидной активности не проявил.

Таким образом, при изучении противотрихомонадной активности в эксперименте in vitro определена трихомонадостатическая концентрация эфирного масла Artemisia kazakorum , составляющая 0,25 мг/мл; и трихомонадоцидная концентрация, составляющая 0,5 мг/мл. Препарат сравнения в стандартной дозе 1,9 мг/мл показал трихомонадоцидную активность. Следует отметить, что представленные на исследование эфирные масла Artemisia kazakorum и Achillea micrantha, рекомендованы в клиническую практику для лечения гнойно-воспалительных заболеваний, вызванных условно-патогенными микроорганизмами. Кроме того, изучение in vivo эфирного масла Artemisia kazakorum и Achillea micrantha, на противопаразитарную активность с целью дальнейшего применения его при лечении паразитозов человека и животных.

Литература

  1. Николаевский Н.Д., Еременко А.Е., Иванов И.К. Биологическая активность эфирных масел, Москва, 2005, 144 с.

  2. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. - Москва, 2000.- С. 18-24.



1   ...   4   5   6   7   8   9   10   11   ...   45

Похожие:

Министерство здравоохранения республики казахстан карагандинский государственный медицинский университет icon1. Линейные элементы электронных схем
Министерство образования и науки республики казахстан карагандинский государственный технический университет
Министерство здравоохранения республики казахстан карагандинский государственный медицинский университет icon1. Линейные элементы электронных схем
Министерство образования и науки республики казахстан карагандинский государственный технический университет
Министерство здравоохранения республики казахстан карагандинский государственный медицинский университет iconМинистерство образования и науки республики казахстан карагандинский государственный технический университет
Программа вступительного экзамена по дисциплине «Основы технической эксплуатации тт»
Министерство здравоохранения республики казахстан карагандинский государственный медицинский университет iconРеспублики Казахстан Карагандинский государственный технический университет
Государственная программа развития образования в Республике Казахстан на 2011 – 2020 годы
Министерство здравоохранения республики казахстан карагандинский государственный медицинский университет iconМинистерство образования и науки республики казахстан карагандинский государственный технический университет
Перечень дисциплин вступительного экзамена для магистрантов по специальности 6М090100 «Организация перевозок, движения и эксплуатация...
Министерство здравоохранения республики казахстан карагандинский государственный медицинский университет iconН ациональный банк республики казахстан карагандинский филиал пресс релиз №3
Карагандинский филиал Государственного учреждения «Национальный Банк Республики Казахстан» информирует об объявлении Национальным...
Министерство здравоохранения республики казахстан карагандинский государственный медицинский университет iconПрограмма и задания вступительного экзамена для магистрантов по специальности 6М073100 безопасность жизнедеятельности и защита окружающей среды кафедры: «Рудничная аэрология и охрана труда»
Министерство образования и науки республики казахстан карагандинский государственный технический университет
Министерство здравоохранения республики казахстан карагандинский государственный медицинский университет iconПрограмма и задания вступительного экзамена для магистрантов по специальности 6М073100 безопасность жизнедеятельности и защита окружающей среды кафедры: «Рудничная аэрология и охрана труда»
Министерство образования и науки республики казахстан карагандинский государственный технический университет
Министерство здравоохранения республики казахстан карагандинский государственный медицинский университет iconРеспублики Казахстан Карагандинский государственный технический университет
О реализации учебных, научных и исследовательских программ в рамках инновационного консорциума «Корпоративный Университет»
Министерство здравоохранения республики казахстан карагандинский государственный медицинский университет iconРеспублики Казахстан Карагандинский Государственный Технический Университет
Программа вступительного экзамена по дисциплине «Алгоритмизация и программирование»
Разместите кнопку на своём сайте:
Библиотека


База данных защищена авторским правом ©lib.znate.ru 2014
обратиться к администрации
Библиотека
Главная страница