Министерство здравоохранения республики казахстан карагандинский государственный медицинский университет




НазваниеМинистерство здравоохранения республики казахстан карагандинский государственный медицинский университет
страница13/45
Дата17.04.2013
Размер2.71 Mb.
ТипДокументы
1   ...   9   10   11   12   13   14   15   16   ...   45

Н. М. Бисенова, А. С. Ергалиева

АНТИБИОТИКОЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ ШТАММОВ АCINETOBACTER BAUMANNII, ВЫДЕЛЕННЫХ ОТ БОЛЬНЫХ РЕАНИМАЦИИ


Национальный научный медицинский центр, (Астана)


Специфика отделений реанимации и интенсивной терапии способствуют возникновению у них инфекционных осложнений

Полиэтиологичность современных гнойно-воспалительных процессов требует постоянного контроля за микрофлорой очагов нагноения. Возрос удельный вес различных микроорганизмов – представителей семейства Enterobacteriaceae, группы неферментирующих грамотрицательных бактерий. Постоянный микробиологический мониторинг за видовым составом, свойствами и структурой антибиотикорезистентности возбудителей больных реанимации необходим для выбора препаратов для профилактики и антибиотикотерапии.

Результаты наших многолетних исследований по мониторингу этиологической структуры больных реанимации показали, что в последние годы лидирующую позицию наряду с Pseudomonas aeruginosa занял Acinetobacter baumannii.

Данная работа посвящена изучению чувствительности к антибиотикам штаммов Acinetobacter baumannii, выделенных от больных реанимации за 2010 – 2011 годы.

Проведено микробиологическое исследование больных реанимации находившихся на лечении в Национальном научном медицинском центре. Количественному бактериологическому исследованию подвергалось содержимое гнойных ран, дренажей, трахеостом данных больных. Микроорганизмы, после выделения чистой культуры и окраски по Граму, идентифицировали на микробиологических компьютерных анализаторах. Антибиотикочувствительность выделенных штаммов определяли на микробиологических компьютерных анализаторах «Микротакс» и «Mini-API» и диско-диффузионным методом, согласно методическим указаниям «Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам», 2004 г.

Процент высеваемости Acinetobacter baumannii от больных реанимации в 2010 году составил 5,6%, однако уже в 2011 году этот показатель повысился до 24,1% .

Наиболее активными антибактериальными препаратами в отношении Acinetobacter baumannii был полимиксин, чувствительность к которому составила 100%, как в 2010 году, так и в 2011 году (антибиотик не применяется в клинике).

В 2010 году чувствительность Acinetobacter baumannii к имипенему была 71,4%, к меропенему значительно ниже и составила 43,8%. Но в 2011 году антибактериальная активность обоих карбопенемов в отношении реанимационных штаммов Acinetobacter baumannii резко снизилась и составила 14,3%.

К цефтазидиму наблюдалось снижение чувствительности с 14,2% в 2010 году до 7,1% в 2011 году.

Из аминогликозидов наиболее активными антибактериальными препаратами в отношении реанимационных штаммов Acinetobacter baumannii оставались амикацин и нетилмицин. Если в 2010 году чувствительность выделенных штаммов к амикацину составила 85,7%, то в 2011 году она снизилась до 14,3%. Напротив, антибактериальная активность нетилмицина к реанимационным изолятам Acinetobacter baumannii в течение наблюдаемых лет была стабильной, на уровне 80% (антибиотик не применяется в клинике).

К хинолонам (ципрофлоксацину, офлоксацину, левофлоксацину, пефлоксацину) чувствительность Acinetobacter baumannii колебалась в пределах от 28,7% в 2010 году до 7,1% в 2011 году.

Процентный показатель антибактериальной активности доксициклина в отношении изученных культур в 2010 году составил 85,7% в 2011 году он снизился до 57%.

Таким образом, результаты изучения чувствительности к антибиотикам реанимационных штаммов Acinetobacter baumannii за 2010-2011 годы, свидетельствуют о нарастании резистентности практически ко всем применяемым в клинической практике антибактериальным препаратам.


Е. И. Бондаренко, Д. И. Тимофеев, М. К. Иванов

ВЫЯВЛЕНИЕ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ИНФЕКЦИЙ, ПЕРЕНОСИМЫХ КЛЕЩАМИ, С ПОМОЩЬЮ НАБОРОВ СЕРИИ «РЕАЛ-БЕСТ» С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ПЦР-АНАЛИЗА В РЕЖИМЕ РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ.


ЗАО «Вектор-Бест», лаборатория ПЦР, Институт цитологии и генетики СО РАН, лаборатория структуры генома, (Новосибирск)


Введение. Территория СНГ является одним из самых больших в мире ареалов распространения иксодовых клещей (от стран Балтии, Белорусии, Украины и Казахстана до Тихоокеанского побережье России). Ежегодно на этой территории регистрируется более полумиллиона пострадавших от их укусов. При этом многие не замечают присасывание паразита, забывают или игнорируют факт контакта с ним, либо не имеют возможности обра-титься за помощью в лечебно-профилактические учреждения (ЛПУ) для анализа клеща на наличие возбудителей заболеваний и проведения превен-тивной терапии. Поэтому реальное число укушенных клещами может превышать имеющиеся статистические данные по каждой из стран СНГ.

Иксодовые клещи являются активными переносчиками возбудителей целого ряда заболеваний человека, объединяемых термином “клещевые инфекции” (КИ). Диагностика КИ, как правило, проводится с учетом эпидемиологического анамнеза (укус клеща, пребывание в лесопарковой зоне эндемичного района и т.п.), на основании лабораторного анализа и клинических признаков заболевания. Однако, последние далеко не всегда позволяют правильно проводить дифференцированную диагностику, поскольку одни и те же признаки (например, общемозговые симптомы или неврологические нарушения) характерны для совершенно различных заболеваний. В России, как и в других странах СНГ, систематически осуществляется лабораторная диагностика и эпидемиологический надзор таких КИ, как вирусный клещевой энцефалит (ВКЭ) и иксодовый клещевой боррелиоз (ИКБ). В то же время лабораторная диагностика таких КИ, как гранулоцитарный анаплазмоз человека (ГАЧ), моноцитарный эрлихиоз человека (МЭЧ) и систематический эпидемиологический надзор над ними до сих пор не получили распространения. При этом этиология сезонных острых лихорадочных проявлений, возникающих после присасывания клещей на территории России, в ряде случаев (от 14 до 40% и более) остается невыясненной [1, 2].

ГАЧ и МЭЧ, объединенные в недавнем прошлом под термином “эрлихиозы человека”, – острые инфекционные трансмиссивные заболевания, переносимые иксодовыми клещами. Инфекционными агентами являются облигатные внутриклеточные микроорганизмы Anaplasma phagocytophilum (в случае ГАЧ), Ehrlichia muris и Ehrlichia chaffeensis (в случае МЭЧ), входящие в состав двух родов, Anaplasma и Ehrlichia, объединенных в семейство Anaplasmataceae (порядок Rickettsiales, класс Proteobacteria) [3]. Эти бактерии поражают лейкоциты (гранулоциты в случае ГАЧ, моноциты и мононуклеарные фагоциты при МЭЧ), а также эндотелиальные клетки сосудов. Жизненный цикл возбудителей ГАЧ и МЭЧ содержит стадии размножения как в иксодовых клещах, являющихся специфичными переносчиками, так и в позвоночных животных-прокормителях клещей. С помощью молекулярно-биологи-ческих методов возбудители ГАЧ и МЭЧ выявлены в клещах и млекопитающих практически во всех регионах, где распространены иксодовые клещи – во многих странах Европы, в России, Корее, Китае, Японии и США [4]. Основной путь заражения людей анаплазмами и эрлихиями - укус клеща рода Ixodes, хотя известны и немногочисленные случаи инфицирования, связанные с переливанием донорской крови, плазмы, с трансплантацией органов, а также при попадании возбудителей с кровью через порезы и микротравмы кожи или через коньюктиву глаз во время разделки туш инфицированных животных [5, 6].

Клинически ГАЧ и МЭЧ почти неразличимы и имеют широкий спектр проявлений: от бессимптомной или субклинической формы до течения, угрожающего жизни, и летального исхода [3]. Поражение лейкоцитов способствует развитию оппортунистических инфекций. Более тяжелое клиническое течение ГАЧ и МЭЧ связано с иммуносупрессивной терапией, диабетом, коллагенозами, пожилым возрастом, а так же с несвоевременной диагностикой или отсутствием лечения. Летальные исходы составляют от 0,5% до 3,5%, большинство из которых связано с оппортунистическими инфекциями и инвазиями, такими как, диссеминированный кандидоз, легочной аспергиллез, некротизирующий герпетический фарингит, криптококкоз. При своевременном диагностировании ГАЧ и МЭЧ успешно поддаются лечению с помощью доксициклина и других антибиотиков тетрациклинового ряда [3, 5].

По данным американских исследователей диагностическая чувствительность ПЦР-анализа при выявлении возбудителя ГАЧ варьирует от 67 до 90%, а для МЭЧ от 60 до 85% [7]. Такой относительно высокий уровень чувствительности может быть обусловлен тем, что в одном инфицированном лейкоците количество анаплазм или эрлихий может составлять от несколько десятков до сотен.

Отсутствие особых патогномоничных симптомов при инфекциях, передающихся иксодовыми клещами, за исключением мигрирующей эритемы у части больных с подтвержденным диагнозом ИКБ, а также первичного аффекта при некоторых клещевых риккетсиозах, определяет необходимость использования методов специфической лабораторной диагностики КИ. Клинические признаки большинства заболеваний, переносимых клещами, могут проявиться лишь спустя длительное время. Поэтому при укусе клеща актуальна превентивная терапия, основанием для назначения и выбора которой является обнаружение в клеще возбудителей КИ. Показано, что проведение превентивной антибиотикотерапии в первые 5 дней с момента укуса предотвращает развитие заболевания ИКБ в 95% случаев [8]. Наличие в анамнезе укуса клеща, зараженного одним или несколькими возбудителями КИ, может способствовать постановке правильного диагноза заболевания и его адекватного лечения даже в том случае, если пациент обратился за помощью через существенное время после укуса.

Отдельной сложной задачей является диагностика клещевых микст-инфекций. В определенных случаях могут возникать клинические симптомы лишь одного заболевания, в то время как второе протекает латентно. В других случаях – одновременно могут проявляться клинические признаки обеих нозологических форм. В связи с этим при отсутствии патогномоничных признаков одной или одновременно двух инфекций заключение делают по результатам серологических исследований. Однако серологическая верификация диагноза нередко отсрочена на 2-3 недели и более, а в некоторых случаях и невозможна (серонегативное протекание заболевания при ИКБ, вакцинация против ВКЭ и др.), поэтому важнейшее значение имеет информированность пациента и лечащего врача о вероятности возникновения того или иного заболевания после нападения клеща.

Приведенные выше соображения указывают на необходимость лабораторного анализа клеща, снятого с пострадавшего, с целью одновременного выявления в нем всех актуальных для данного региона возбудителей КИ. Для решения этой задачи в настоящее время наиболее перспективно выявление нуклеиновых кислот (ДНК и РНК) возбудителей КИ (например, при помощи ПЦР). Альтернативные методики (микроскопические и основанные на иммуноферментном выявлении антигенов возбудителей заболеваний) не обладают достаточной аналитической чувствительностью и специфичностью и требуют индивидуального подхода при выявлении разных маркеров. В то же время метод ПЦР позволяет по единой методике выявлять сразу несколько маркеров в одной пробе и при этом характеризуется относительно высокой скоростью исполнения. Благодаря этому ПЦР-анализ хорошо зарекомендовал себя в лабораторной диагностике КИ во многих странах, в том числе и в России.

В ЗАО “Вектор-Бест” производятся наборы реагентов «РеалБест РНК ВКЭ», «РеалБест ДНК Borrelia burgdorferi s. l.» и «РеалБест ДНК Anaplasma phagocytophilum/Ehrlichia muris, Ehrlichia chaffeensis» для выявления нуклеиновых кислот (НК) возбудителей КЭ, ИКБ, ГАЧ и МЭЧ как в клинических образцах, так и в клещах при помощи ПЦР-анализа с детекцией продуктов реакции в режиме реального времени (ПЦР-РВ). Поэтому цель настоящей работы – комплексный анализ клещей и крови мелких лесных грызунов на предмет выявления в них выше перечисленных возбудителей КИ.

Материалы и методы. Для исследования были использованы две выборки клещей рода Ixodеs, содержащие 306 (выборка №1) и 443 особи (выборка №2) по отдельности, собранные «на флаг» в разных местах Тогучинского района Новосибирской области в мае 2009 и 2011 гг. Выделение суммарной НК из суспензий клещей после их индивидуальной гомогенизации проводили с помощью набора «РеалБест экстракция 100» (ЗАО “Вектор-Бест”, Новосибирск), как описано ранее [9]. Кроме того были исследованы 22 образца крови мелких грызунов, красных и красносерых полевок (Myodes rutilus, Myodes rufocanus), отловленных в Омской области в 2011. Кровь от каждой особи собиралась в отдельную стерильную пробирку, содержащую лизирующий буфер (4М гуанидинтиоционат; 0,1 М Трис-HCl pH 6,4; 0,045 М ЭДТА pH 8,0; 1,3% Тритон X-100). Соотношение буфер/кровь составляло 2:1, для анализа использовалось по 100 мкл образца. Выделение суммарной НК проводили также с помощью набора «РеалБест экстракция 100» . Для постановки ПЦР использовали по 50 мкл фракций суммарной НК (при выделении из суспензии клещей) и по 10 мкл (выделение из крови животных). Оставшуюся часть выделенного материала замораживали и хранили при –70°С. Выявление НК микроорганизмов в клещах и крови животных проводили на амплификаторе с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени «CFX» («Bio-Rad», США) с помощью наборов реагентов «РеалБест РНК ВКЭ», «РеалБест ДНК Borrelia burgdorferi s.l.» и «РеалБест ДНК Anaplasma phagocytophilum/Ehrlichia muris, Ehrlichia chaffeensis». Для обработки результатов использовали сервисную программу «РеалБест диагностика» [10].

Видовую принадлежность выявленных бактерий подтверждали при помощи секвенирования полиморфных участков генома на автоматическом секвенаторе «ABI Prism 3100 DNA Analyser» («Applied Biosystems», США) с последующим филогенетическим анализом последовательностей ДНК с помощью программы «Vector NTI v 8.0». Сравнение установленных нуклеотидных последовательностей с данными, представленными в “GeneBank”, проводили с помощью поисковой системы “BLAST”.

Результаты и обсуждение. Согласно результатам ПЦР-анализа, общая инфицированность клещей разными видами возбудителей КИ в выборках №1 и №2 составила 62,1% (190 из 306 клещей) и 45,6% (202 из 443) соответственно, при этом наибольший вклад в инфицированность вносят, как и следовало ожидать, возбудители ИКБ. Так ДНК боррелий комплекса Borrelia burgdorferi s.l. выявлена у 55,9% клещей (171 из 306) и у 41,8% (185 из 443) в двух выборках. В результате ранее проведенного филогенетического анализа клещей выборки №1, на основании установленных нуклеотидных последовательностей с данными, представленными в «GeneBank», было показано, что 68,4 % клещей относится к геновиду B. garinii, а 31,6% – к B. afzelii [9].

Далее экспериментально установлено, что на долю микст-инфицированных клещей приходится всего 13,4% (выборка №1, таблица 1) и 5,2% (выборка №2, таблица 2).


Таблица 1. Выявляемость в клещах различных возбудителей КИ. Выборка №1 (306 особей).

Один возбудитель 48,7% (149)

Микст-инфицированность 13,4% (41)

ВКЭ

Б

А

Э

ВКЭ/Б

ВКЭ/Э

Б/А

Б/Э

ВКЭ/Б/А

ВКЭ/Б/Э

Б/А/Э

3,6 %

(11)

42,8%

(131)

0,7%

(2)

1,6%

(5)

2,6 %

(8)

0 %

(0)

2,3%

(7)

7,5%

(23)

0 %

(0)

0,3 %

(1)

0,7 %

(2)

ВКЭ - вирус клещевого энцефалита; Б - B. burgdorferi s.l.; А - Anaplasma phagocytophilum;

Э - Ehrlichia muris.


Таблица 2. Выявляемость в клещах различных возбудителей КИ. Выборка №2 (443 особи).

Один возбудитель 40,4% (179)

Микст-инфицированность 5,2 % (23)

ВКЭ

Б

А

Э

ВКЭ/Б

ВКЭ/Э

Б/А

Б/Э

ВКЭ/Б/А

ВКЭ/Б/Э

Б/А/Э

1,4%

(6)

36,8 %

(163)

1,1 %

(5)

1,1 %

(5)

1,4 %

(6)

0,2 %

(1)

0,5 %

(2)

2,3 %

(10)

0,2 %

(1)

0,5 %

(2)

0,2 %

(1)

Общая выявляемость ДНК A.phagocytophilum в двух выборках составила 3,6% (11 из 306 клещей) и 2% (9 из 443) соответственно. С помощью ПЦР-анализа ДНК E.muris была обнаружена в 10,1% (31 из 306) и 4,3% (19 из 443) анализируемых образцах. Анализ нуклеотидных последовательностей гена groESL 10 случайно выбранных образцов, содержащих в клещах ДНК A.phagocytophilum, подтвердил их принадлежность к соответствующему виду. Анализ последовательности гена gltA в 10 выделенных образцах ДНК эрлихий показал наличие в клещах ДНК Ehrlichia muris (отметим, что на сегодняшний день на территории РФ из двух возбудителей заболевания МЭЧ пока удалось выявить только E. muris). Полученные нами в результате секвенирования фрагмента генома Ehrlichia muris данные подтвердили консервативность последовательности участка гена gltA, используемого в качестве мишени для выявления патогена.

Переносимые клещами различные виды микроорганизмов локализуются преимущественно в разных органах, тканях или даже в определенных клеточных структурах паразита. В связи с этим, между разными патогенами в организме клеща, как правило, не возникает антагонистических отношений, что обеспечивает относительную их автономность [11]. Так, полученные нами данные подтверждают, что в иксодовых клещах наличие боррелий комплекса B.burgdorferi s.l. или вируса клещевого энцефалита не исключает их инфицированности возбудителями ГАЧ и МЭЧ: более половины случаев выявления последних приходилось на клещей с микст-инфекциями.

Полученные данные свидетельствуют о высокой зараженности исследованных иксодовых клещей возбудителями КИ, в том числе и возбудителями ГАЧ и МЭЧ, что указывает на значительный риск инфицирования в случае нападения и вероятность микст-инфицирования человека. Значения уровня инфицированности клещей различными возбудителями, полученные нами на территории Новосибирской области, не противоречат данным по РФ, опубликованным ранее [2, 12, 13, 14]. Так, встречаемость A.phagocytophilum и E.muris во взрослых иксодовых клещах на азиатской части России варьирует от 0 до 5,6% и от 0 до 14,3% соответственно [13]. Процент инфицированности клещей не является величиной постоянной, а может меняться год от года. Проведенные с 2005 по 2008 г.г. исследования в различных районах Норвегии показали, что инфицированность клещей боррелиями комплекса B.burgdorferi s.l. на одном и том же участке в разные годы варьировало от 5,2 до 33,3%, а A.phagocytophilum от 3, 4 до 15,6% [15].

Для оценки возможности выявления возбудителей КИ с помощью разработанных ПЦР-наборов в образцах крови была использована кровь 22 мелких лесных грызунов. Образцы анализировали на присутствие ДНК возбудителей ИКБ, ГАЧ и МЭЧ. В трех образцах была выявлена ДНК возбудителя ГАЧ, в двух других - ИКБ. Еще двое животных были микст-инфицированы возбудителями ГАЧ и ИКБ. В крови трех других грызунов детектирована ДНК одновременно трех патогенов (ГАЧ, МЭЧ, ИКБ). При этом содержание анаплазмы и эрлихий в крови грызунов в положительных образцах данной выборки отличалось более, чем на 2 порядка. Выявление возбудителей ГАЧ и МЭЧ в полевках, которые являются животными-прокормителями иксодовых клещей, подтверждается рядом исследователей [4].

Таким образом было показано, что наборы реагентов «РеалБест ДНК Borrelia burgdorferi s.l.», «РеалБест РНК ВКЭ» и «РеалБест ДНК Anaplasma phagocytophilum/Ehrlichia muris, Ehrlichia chaffeensis» могут быть использованы в лабораториях ЛПУ для рутинного экспресс-анализа снятых с людей клещей с целью выявления в них патогенов и предупреждения развития целого спектра заболеваний у пострадавших. Также данные наборы могут быть применены для анализа препаратов крови и эпидемиологических исследований. Объем и качество препарата НК, получаемого из одного клеща при использовании методики пробоподготовки, рекомендованной производителем, достаточны для анализа с помощью всех трех наборов реагентов.

Разработанные диагностические ПЦР-наборы серии «РеалБест» характеризуются высокой специфичностью и чувствительностью, достаточной для выявления возбудителей КИ в клещах и в случае низких нагрузок (порядка 500-1000 копий НК в клеще). Эти особенности, а также возможность одновременного выявления нескольких возбудителей КИ в составе одного паразита при помощи ПЦР-РВ, делают данный подход безусловно актуальным для массовой лабораторной диагностики, направленной на выявление возбудителей в клещах, поступающих в диагностические лаборатории от пострадавшего населения, и проведения превентивного этиотропного лечения с целью предотвращения развития заболеваний.

Все использованные в работе ПЦР-наборы реагентов серийно выпускаются на производстве ЗАО «Вектор-Бест» в форматах, адаптированных к наиболее используемым в России амплификаторам для ПЦР-РВ: «iQ iCycler», «iQ5 iCycler» и «CFX96» («Bio-Rad», США), «ДТ-96» (ООО «НПО ДНК-Технология», Россия), «Rotor-Gene 3000», «Rotor-Gene 6000» и «Rotor-Gene Q» (фирма Qiagen, Германия). Наборы реагентов «РеалБест ДНК Borrelia burgdorferi s. l.», «РеалБест РНК ВКЭ» и «РеалБест ДНК Anaplasma phagocytophilum/Ehrlichia muris, Ehrlichia chaffeensis» государственно зарегистрированы как изделия медицинского назначения, которые приказом Росздравнадзора разрешены к производству, продаже и применению на территории Российской Федерации.

Литература

  1. Афанасьева М.В., Коренберг Э.И., Воробьева Н.Н. и др.. Место заболеваний, передающихся иксодовыми клещами, в инфекционной патологии Пермcкой области. Эпидемиол. и вакцинопрофилактика 2004; (2): 27 -9.

  2. Шихин А.В., Баженова И.В., Романенко В.Н. и др. Современная эпидемиологическая ситуация по природно-очаговым инфекциям в Томской области// Национальные приоритеты России. Современные аспекты природной очаговости болезней 2011; 5 (2): 69 -70.

  3. Рудаков Н.В., Шпынов С.Н., Оберт А.С. Анаплазмозы и эрлихиозы человека – новая проблема инфекционной патологии в России. Пособие для врачей, Омск, 2005.

  4. Rar V., Golovljova I. Anaplasma, Ehrlichia, and "Candidatus Neoehrlichia" bacteria: Pathogenicity, biodiversity, and molecular genetic characteristics, a review; Infect. Genet. Evol. 2011; 11 (8): 1842 -61.

  5. Данные CDC (Center for Disiase Control and Prevention) http://www.cdc.gov/ ticks/diseases/index.html.

  6. Bakken J.S., Krueth J., Lund T. et all Exposure to deer blood may be a cause of human granulocytic ehrlichiosis. Clin. Infect. Dis. 1996; 23 (1): 198.

  7. Dumler J.S., Madigan J.E., Pusterla N., Bakken J.S. Ehrlichioses in humans: epidemiology, clinical presentation, diagnosis, and treatment. Clin. Infect. Dis. 2007; 45: 45 -51.

  8. Лобзин Ю.В., Рахманова А.Г., Антонов В.С. и др. //Эпидемиология, этиология, клиника, диагностика,лечение и профилактика иксодовых клещевых боррелиозов. (Рекомендации для врачей). СПб., 2000. http://www.epid.ru/docs/infdoc5.html

  9. Бондаренко Е.И., Тимофеев Д.И., Иванов М.К. Новый набор реагентов «РеалБест ДНК Borrelia burgdorferi s. l.». Новости «Вектор-Бест» 2010; 55 (1): 2 -7.

  10. Иванов М.К., Порываев В.Д., Трухина А.В., Кандрушин Е.В. Наборы серии «РеалБест» для диагностики вирусных патогенов методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени. Концепция и особенности конструирования// Новости «Вектор-Бест» 2008; 50 (4): 2 -5.

  11. Коренберг Э.И. Изучение и профилактика микстинфекций, передающихся иксодовыми клещами. Вестник РАМН 2001; (11): 41 -5.

  12. Матущенко А.А., Рудакова С.А., Коренберг Е.И. Матущенко А.А., Рудакова С.А., Коренберг Е.И. Предварительные данные эколого-эпидемиологического исследования болезни Лайма в Западной Сибири. Мед. паразит. 1993; (4): 27 -9.

13. Rar V.A., Epikhina T.I., Livanova N.N., Ivanov L.I. Genetic variability of Anaplasma phagocytophilum in Ixodes persulcatus ticks and small mammals in the Asian part of Russia. Vector-Borne and Zoonotic Diseases 2011; 11: 1013 -21.

  1. Травина Н.С., Скрынник С.М., Карань Л.С. Возбудители трансмиссивных инфекций, передаваемых клещами I.persulcatus в Зауралье// Национальные приоритеты России. Современные аспекты природной очаговости болезней 2011. 5 (2): 76 -7.

  2. Rosef O., Paulauskas A. and Radzijevskaja J. Prevalence of Borrelia burgdorferi sensu lato and Anaplasma phagocytophilum in questing Ixodes ricinus ticks in relation to the density of wild cervids. Acta Veter. Scandinavica 2009; 51 (1): 47 -54.



1   ...   9   10   11   12   13   14   15   16   ...   45

Похожие:

Министерство здравоохранения республики казахстан карагандинский государственный медицинский университет icon1. Линейные элементы электронных схем
Министерство образования и науки республики казахстан карагандинский государственный технический университет
Министерство здравоохранения республики казахстан карагандинский государственный медицинский университет icon1. Линейные элементы электронных схем
Министерство образования и науки республики казахстан карагандинский государственный технический университет
Министерство здравоохранения республики казахстан карагандинский государственный медицинский университет iconМинистерство образования и науки республики казахстан карагандинский государственный технический университет
Программа вступительного экзамена по дисциплине «Основы технической эксплуатации тт»
Министерство здравоохранения республики казахстан карагандинский государственный медицинский университет iconРеспублики Казахстан Карагандинский государственный технический университет
Государственная программа развития образования в Республике Казахстан на 2011 – 2020 годы
Министерство здравоохранения республики казахстан карагандинский государственный медицинский университет iconМинистерство образования и науки республики казахстан карагандинский государственный технический университет
Перечень дисциплин вступительного экзамена для магистрантов по специальности 6М090100 «Организация перевозок, движения и эксплуатация...
Министерство здравоохранения республики казахстан карагандинский государственный медицинский университет iconН ациональный банк республики казахстан карагандинский филиал пресс релиз №3
Карагандинский филиал Государственного учреждения «Национальный Банк Республики Казахстан» информирует об объявлении Национальным...
Министерство здравоохранения республики казахстан карагандинский государственный медицинский университет iconПрограмма и задания вступительного экзамена для магистрантов по специальности 6М073100 безопасность жизнедеятельности и защита окружающей среды кафедры: «Рудничная аэрология и охрана труда»
Министерство образования и науки республики казахстан карагандинский государственный технический университет
Министерство здравоохранения республики казахстан карагандинский государственный медицинский университет iconПрограмма и задания вступительного экзамена для магистрантов по специальности 6М073100 безопасность жизнедеятельности и защита окружающей среды кафедры: «Рудничная аэрология и охрана труда»
Министерство образования и науки республики казахстан карагандинский государственный технический университет
Министерство здравоохранения республики казахстан карагандинский государственный медицинский университет iconРеспублики Казахстан Карагандинский государственный технический университет
О реализации учебных, научных и исследовательских программ в рамках инновационного консорциума «Корпоративный Университет»
Министерство здравоохранения республики казахстан карагандинский государственный медицинский университет iconРеспублики Казахстан Карагандинский Государственный Технический Университет
Программа вступительного экзамена по дисциплине «Алгоритмизация и программирование»
Разместите кнопку на своём сайте:
Библиотека


База данных защищена авторским правом ©lib.znate.ru 2014
обратиться к администрации
Библиотека
Главная страница