Лекция 9 Взаимодействия определяющие структуру молекул белков




Скачать 87.25 Kb.
НазваниеЛекция 9 Взаимодействия определяющие структуру молекул белков
Дата07.10.2012
Размер87.25 Kb.
ТипЛекция

Лекция 9


Взаимодействия определяющие структуру молекул белков.

Согласованность структуры белков по ближним взаимодействиям. Согласованность локальных и дальних по цепи, взаимодействий. Энергетика локальных структурных фрагментов. Основные принципы термодинамической стабильности глобулярных белков.


Самоорганизация полипептидной цепи. Термодинамические аспекты. Энтальпийно-энтропийная компенсация. Кинетические аспекты. Основные гипотезы и модели самоорганизации молекулы белка. Энергетический конформационный спектр. Способность к самоорганизации и аминокислотный состав белковой молекулы. Решеточные модели полипептидов. Связь между энергетическим конформационным спектром и способностью последовательности к самоорганизации в уникальную структуру.


Взаимодействия определяющие структуру молекул белков


  • стандартный набор взаимодействий

  • упругие деформации валентного остова,

  • потенциалы внутреннего вращения,

  • ван дер ваальсовы взаимодействия валентно не связанных атомов,

  • электростатические взаимодействия валентно не связанных атомов,

  • Н-связи

  • S-S мостики - специальная валентная связь

  • взаимодействие с растворителем

Согласованность структуры белков по ближним взаимодействиям


а) карта Рамачандрана для дипептида; б) статистика , реальных белков






Рис. 9-1.

хорошее сходство карт =

  • конформации выгодные на уровне дипептида, (взаимодействия соседних по цепи атомов) остаются выгодными и в длинных полимерных белковых структурах

  • конформации выгодные по ближним по цепи атомам закрепляются и стабилизируются в полимерных структурах

  • конформации и энергии локальных структурных образований макромолекулы близки к оптимальным

  • макромолекула сложена из энергетически не напряженных блоков


= принцип согласованности ближних и дальних по цепи взаимодействий

Энергетика локальных структурных фрагментов

статистика наблюдения самых разных элементов белковых структур в белках имеет вид


   ВСТРЕЧАЕМОСТЬ(элемент структуры) ~

exp( - ЭНЕРГИЯ(элемент структуры)/kTC)

где TC близка к температуре денатурации белка


Это соотношение, основа для экстракции энергетики элементов белковых структур из анализа экспериментальных структурных данных -


ЭНЕРГИЯ(элемент структуры) =

- kTC ln[ВСТРЕЧАЕМОСТЬ(элемент структуры)


Основные принципы термодинамической стабильности глобулярных белков


1. Каркас белковой структуры представляет собой компактные слои вытянутых регулярных твердых тел (-спиралей и -участков), а нерегулярные перемычки идут по поверхности глобулы, не пересекая ни друг друга, ни торцов структурных сегментов.

  1. Физическая причина такого устройства  —  в том, что оно наиболее благоприятствует стабильности нативной глобулы:

  • неполярные боковые группы формируют гидрофобное ядро и укрываются от воды,

  • пептидные группы главной цепи, насыщают свои водородные связи при погружении в компактную глобулу

  • нерегулярные участки основной цепи формируют водородные связи с полярным растворителем (водой)

  • высокая плотность упаковки атомов боковых групп и основной цепи приводит к большой (выгодной) энергии ван дер ваальсовых взаимодействий

  • Характерные мотивы укладки белковой цепи в доменах












Рис. 9-2.

Характерные мотивы укладки белковой цепи в  и  белках.

слоевая упаковка - и -структур, каждый слой сложен либо только из -спиралей, либо только из -тяжей, но не из -спиралей и -тяжей одновременно












Рис. 9-3.

Основные принципы термодинамической стабильности глобулярных белков

нативная конформация оптимально стабилизирована различными типами взаимодействий:


  • ван дер ваальсовы (плотная, идеальная подгонка боковых групп)

  • гидрофобные (поверхность доступная водному растворителю – минимальная)

  • полная энергия электростатических взаимодействий атомов между собой и с растворителем – минимальная



Энергии неправильно сложенных структур 7-ми белков

относительно нативной

в зависимости от RMSD отклонения от нативной структуры










Рис.9-4.





мера соответствия двух конформаций 1,2 молекулы



энергетическая щель G ~ 20 kcal/mol отделяет нативные конфомации от ближайших по энергии ненативных


[Y.N.Vorobjev and J.Hermans Protein Science (2001) 10: 2498-2506]


Самоорганизация полипептидной цепи

Термодинамические аспекты


Стабильность структуры – зависит от условий среды (Т, рН, агентов денатурантов (мочевины))


Плавление – тепловая денатурация – обратима, т.е.полное восстановление нативной структуры (Анфинсен, 1960)

Белок в воде – описывается стандартной статистической термодинамикой



Эксперимент – плавление = переход типа ВСЕ или НИЧЕГО = присутствуют два состояния

  • фазовый переход первого рода ( тв.т. – жидкость) в микроскопической системе - S образный




плавление = переход типа

ВСЕ или НИЧЕГО =

наблюдаются два состояния, нет промежуточных


фазовый переход первого рода

( тв.т. – жидкость) в микроскопической системе



Рис. 9-5.

денатурация типа "все-или-ничего" относится к небольшим глобулярным белкам и отдельным доменам крупных белков, а денатурация больших глобулярных белков, как показывают многочисленные опыты, слагается из плавления входящих в них доменов.


Типичные оценки термодинамических величин


Gm = GN - GU = 0 при Т=Тm

Gm = Hm - TmSm


При физиологических условиях

Gm ~ -0.1 -- -0.5 ккал/моль/остаток

Hm ~ -2.5 -- -2.0 ккал/моль/остаток

TSm ~ 1.0 –1.5 ккал/моль/остаток, Sm ~ 3. – 5. э.е. /остаток,

э.е.=кал/моль/град


Транспорт остатков гидрофобного ядра в раствор

Gsolv ~ -1. -- -1.5 ккал/моль/остаток


Белки – энтропийно – энтальпийно компенсированные системы


Оценка потери энтропии – относительное уменьшение доступного фазового пространства (,)


Sm ~ Rln(U/N)~ 3 - 5. э.е.


U/N ~ 5 -- 10 т.е. в расплавленном белке число состояний на остаток

больше (с учетом ротамеров боковых групп) в 5 – 10 раз

Профиль ППЭ в окрестности нативного состояния

Глубокий минимум


Отделенный от ближайших состояний достаточно высоким потенциальным барьером

необходимость противостоять тепловым флуктуациям энергии


<H2>1/2 = RT(3Nat)1/2 = RT(Cv/R)1/2 ~ 30 – 40 kcal/mol

Nat ~ 1000 – 2000 ~ 100 – 200 остатков



Е








компактность

Рис.9-6.


Кинетические аспекты самоорганизации


Время самоорганизации домена – 10-2 – 10 сек

Время образования альфа спирали - 10-6 сек


Полное число конформационных состояний белковой глобулы


~ 10N , N~ 100 остатков

время перескока в соседнее состояние ~ 10-13 сек

время самосборки при случайном блуждании по ППЭ

~ 10N-13 сек ~ 10100 сек >> время жизни вселенной


  • Парадокс Левинталя – приводит к выводу




  • пути самоорганизации белковой глобулы не случайны,

хорошо определены, детерминированы последовательностью остатков,

ППЭ должна иметь вороночную структуру.

Вороночная структура ППЭ


Экспериментальная интерпретация ППЭ (2000)

Hen egg Lysozyme, 129 остатков




Рис. 9-7.

Модель ППЭ для решеточной модели НР


5*5 решеточная модель, бусиничная НР модель 125-бусинок,

гидрофобно-гидрофильный контактный потенциал взаимодействия бусинок,

моделирование методом МК (2000)





Рис. 9-8.Стадийная модель самоорганизации Птицина (1973)




Рис. 9-9.

Расплавленная глобула – боковые группы не полностью упакованы

      





Рис. 9-10.

Конформационный энергетический спектр

самоорганизующихся последовательностей

Все ли последовательности способны к самоорганизации? – нет

Исследование на решеточных моделях НР – бусиничные модели


  • число состояний велико, но конечно, может быть перебрано методом МК

  • исследована корреляция между

последовательностью, спектром энергии, способностью к самосборке и её скоростью


основное требование к энергетическому спектру –

  • нативное состояние должно быть отделено достаточно широкой энергетической щелью от ближайших ненативных








 


Рис.9-11. Зависимости энтропии S от энергии Е для белковой цепи (а) и для цепи случайного гетерополимера (б). Касательные к нижней части кривых S(E), определяют температуру TC стеклования случайного полимера и температуру TМ плавления белка (наклон второй касательной несколько меньше, т.е. TМ несколько выше TС). Внизу показаны характерные формы энергетических спектров этих молекул.

Основной чертой спектра белка  —  "отобранного" гетерополимера  —  является энергетическая щель (ширины Е >> kTC) между основной, самой стабильной укладкой цепи и другими, не похожими на нее укладками.

Немногие структуры, чьи энергии приходятся на эту щель, представляют собой более или менее "разболтанные" или "недосвернутые" варианты основной укладки цепи.
Доля "белковоподобных" последовательностей из всех возможных последовательностей

ДОЛЯ(Е) ~ ехр(-Е/kTC) ~ 10-30 ,

Е ~ 30 ккал/моль , Тс ~ 350 K

Всего доменов из 100 остатков ~ 10020 ~ 1040

~ 1010 самоорганизующихся последовательностей белков

Теоретичские физические исследования разнообразных моделей гетерополимерных цепей показали, что в случайных гетерополимерах Е- щель не наблюдается. Точнее  —  у случайных цепей она обычно очень мала, так что такие цепи замерзают не скачком, как кристалл или белок, а постепенно, как стекло.
       Значит, необходимая для фазового плавления белка достаточно большая (с шириной Е >> kTC), энергетическая щель между самой стабильной структурой цепи и ее конкурентами возникает не в любой  —  "случайной"  —  аминокислотной последовательности, а создается отбором "белковоподобных", годных для создания белков последовательностей (в частности  —  последовательностей, допускающих плотную упаковку цепи в глобулу).

 Температура TC определяется наклоном кривой S(E) перед самой щелью. TC не зависит от величины Е, т.е. она одинакова и для случайных, и для "белковоподобных" цепей одинакового аминокислотного состава.

 Энергетическая щель  —  фундаментальная вещь в физике белка. Она необходима для того, чтобы белок разрушался только фазовым переходом,  —  т.е. чтобы он, не изменяясь, терпел бы (до известного предела) изменение внешних условий, т.е. для надежности работы белка.

Е-щель необходима и для быстрого и безошибочного сворачивания его нативной структуры.
 

Похожие:

Лекция 9 Взаимодействия определяющие структуру молекул белков iconЛитература: Лекция по теме «Протеолиз»
...
Лекция 9 Взаимодействия определяющие структуру молекул белков iconЛекция Равновесие в гомогенных и гетерогенных системах
Степень диссоциации α – это отношение числа молекул, распавшихся на ионы к общему числу молекул в растворе или отношение концентрации...
Лекция 9 Взаимодействия определяющие структуру молекул белков iconПлан лекций медико-профилактического факультета на осенний семестр 2012-2013 учебного года (нечетные недели)
Лекция 1 14. 09. 12 Введение в предмет биохимия классификация и функции белков их структурная организация, фолдинг белка. Белок –...
Лекция 9 Взаимодействия определяющие структуру молекул белков iconПроект занятия по дисциплине «Химия»
Впечатляющие достижения в этой области, касающиеся молекулярных механизмов наследственности и биосинтезе белков, строения и взаимодействия...
Лекция 9 Взаимодействия определяющие структуру молекул белков iconВекторные свойства поверхностей молекул и катализ 26. 11. 2000 г. Как я уже
Что такое химические взаимодействия? Векторные свойства поверхностей молекул и катализ
Лекция 9 Взаимодействия определяющие структуру молекул белков icon16. Переваривание белков и обмен азота
Общая схема катаболизма белков от поступления пищевых белков до катаболизма аминокислот в клетках. Заменимые и незаменимые аминокислоты....
Лекция 9 Взаимодействия определяющие структуру молекул белков iconБилет №2. Движение молекул. Скорость движения молекул и температура тела. Притяжение и отталкивание молекул. Примеры из жизни Молекулы находятся в постоянном
Молекулы находятся в постоянном хаотичном движении. Доказательством является Броуновское движение беспорядочное движение малых (размерами...
Лекция 9 Взаимодействия определяющие структуру молекул белков iconГетероциклические соединения
К гетероциклам относятся многие алкалоиды, витамины, природные пигменты. Они являются структурными фрагментами молекул нуклеиновых...
Лекция 9 Взаимодействия определяющие структуру молекул белков iconЛекция Вводная лекция
Гасов В. М., Соломонов Л. А. Инженерно-психологическое проектирование взаимодействия человека с техническими средствами. Кн Серия...
Лекция 9 Взаимодействия определяющие структуру молекул белков iconКонтрольная работа №1 (Химия белков, витамины, ферменты, обмен белков и нуклеотидов) Дать определение третичной структуры белков. Указать типы связей, ее стабилизирующие
...
Разместите кнопку на своём сайте:
Библиотека


База данных защищена авторским правом ©lib.znate.ru 2014
обратиться к администрации
Библиотека
Главная страница